碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒

供应商 ：上海西格

库存 ：55

样本 ：Alkaline Phosphatase (ALP) Colorimetric Assay Kit

标记物 ：详见说明书

适应物种 ：详见说明书

应用 ：酶标仪

检测方法 ：酶标仪

检测限 ：0.13-50/100 mL

规格 ：48T/32样,96T/80样

英文名称：Alkaline Phosphatase (ALP) Colorimetric Assay Kit
中文名: 碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒
检测原理
在pH=10的反应液中，碱性磷酸酶催化磷酸苯二钠水解，生成游离酚和磷酸。酚在碱性溶液中与4-氨基安替吡啉结合，并经铁化生成红色的醌的衍生物，根据红色的深浅计算酶活的高低。

关键信息
指标简称 ALP
样本类型 动物血清(浆)、体液、组织及细胞
灵敏度 0.13金式单位/100 mL
检测范围 0.13-50金式单位/100 mL
精密度 批间差：8.5%批内差：5.1%
检测仪器及波长 酶标仪（500-530 nm，最佳检测波长520 nm）
保存条件 2-8℃
有效期 6个月
样本稀释倍数
在正式检测前，需选择2-3个预期差异大的样本稀释成不同浓度进行预实验

注意事项
　　1.该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。
　　2.使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器的安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。
　　3.在仪器尚未接通电源时，电表指针必须于“0”刻线上，若不是这种情况，则可以用电表上的校正螺丝进行调节。
测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
实验结果判断我有妙招：
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3、以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性，P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑，P／N小于1．5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照，与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求：
① 易挥发、低燃点的试剂要密封，放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气，水发生反应的物质要密封，并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂，应将其固体或晶体密封保存，不宜长期存放其水溶液，亚硫酸，氢硫酸溶液要密封存放，钾，钠，白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存，其相应的溶液较固体更易反应，所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封，放于阴凉通风处保存。
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