耶尔森菌通用LAMP试剂盒

保存条件 ：低温冷藏

保质期 ：详见说明书

英文名 ：Universal lamp kit for Yersinia

库存 ：100

供应商 ：上海莼试

规格 ：50T

耶尔森菌通用LAMP试剂盒产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。

产品特点：
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。 在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
 特异性荧光标记：
 TaqMan法
 TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针 相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
 96T
iFABP(Human intestinal fatty acid binding protein) ELISA Kit  人肠脂肪酸结合蛋白     96T
OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit  人氧化低密度脂蛋白     96T
MPIF-1/CCL23(Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit  人骨髓抑制因子1     96T
ADP(Human adiponectin) ELISA Kit  人脂联素     96T
HIS(Human Histamine) ELISA KIT  人组胺     96T
Human Resistin ELISA KIT   人抵抗素     96T
ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit  人骨特异性碱性磷酸酶B     96T
OT/BGP(Human Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA kit  人骨钙素/骨谷氨酸蛋白     96T
sRANKL(Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand) ELISA Kit  人可溶性核因子κB受体活化因子配基     96T
1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3(Human 1,25-dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit  人1,25二羟基维生素D3     96T
Human histon-H2b ELISA Kit  人组蛋白H2b     96T
OPG(Human Osteoprotegerin) ELISA KIT  人骨保护素     96T
BMPR- II (Human Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit  人骨成型蛋白受体Ⅱ     96T
BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A) ELISA Kit  人骨成型蛋白受体1A     96T
BMP-4(Human Bone morphogenetic protein 4) ELISA Ki  人骨成型蛋白4     96T
耶尔森菌通用LAMP试剂盒BMP-2(Human Bone morphogenetic protein 2) ELISA Kit  人骨成型蛋白2     96T
cAMP(Human cyclic adenosine monophosphate) ELISA Kit  人环磷酸腺苷     96T
MASP(Human mannan binding lectin associated serine protease) ELISA Kit  人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶     96T
CDK-7(Human Cyclin-dependent kinase 7) ELISA Kit  人周期素依赖性激酶7     96T
CDK-2(Human Cyclin-dependent kinase 2) ELISA Kit  人周期素依赖性激酶2     96T
CDK-1(Human Cyclin-dependent kinase 1) ELISA Kit  人周期素依赖性激酶1     96T
AMPK(Human Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase) ELISA kit  人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶     96T
LDH(Human Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit  人乳酸脱氢酶     96T
ADAM9(Human A Disintegrin And Metalloprotease 9) ELISA Kit  人解整合素样金属蛋白酶9     96T
BACE2(Human beta-site APP-cleaving enzyme 2) ELISA Kit  人β位淀粉样前体蛋白裂解酶2     96T
UPP1(Human uridine phosphorylase 1) ELISA Kit  人尿嘧啶核苷磷酸化酶1     96T
ADH(Human alcohol dehydrogenase) ELISA Kit  人乙醇脱氢酶     96T
RND1(Human Rho family GTPase 1) ELISA Kit  人Rho家族GTP酶1     96T
RIPK2(Human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2) ELISA Kit  人受体TNFRSF结合丝氨酸苏氨酸激酶2     96T
PLSCR1(Human phospholipid scramblase 1) ELISA KIT  人磷脂爬行酶1     96T
HMGCS1(Human 3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A synthase 1) ELISA Kit  人3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶1     96T
EAR12(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 12) ELISA KIT  人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员12     96T
EAR3(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 3)ELISA Kit  人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员3     96T
EAR2(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 2)ELISA Kit  人嗜酸性白血球相关之检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表： 试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量 荧光PCR反应液 14µL N×14µL 酶混合物 1 µL N×1 µL 总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

实验方法步骤：
方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。      10×PCR buffer 
                  5 μl     dNTP mix （2mM）   
          4 μl     引物1（10pM） 
                2 μl     引物2（10pM） 
                2 μl     Taq酶 （2U/μl）
                1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
   1 μl      加ddH2O至 50 μl 
  视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤
典型的PCR由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。