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文献和实验
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保存条件 :低温冷藏
保质期 :详见说明书
英文名 :Lamp kit for chicken anemia virus
库存 :100
供应商 :上海莼试
规格 :50T
鸡贫血病毒LAMP试剂盒实验步骤典型的PCR由
(1)高温变性模板;
(2)引物与模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。
其主要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
Phospho-SHP2 (Tyr542) 磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗体
Phospho-SHP2 (Tyr584) 磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗体
SMC1 染色体结构维持蛋白1抗体
Phospho-SMC1 (Ser360) 磷酸化染色体结构维持蛋白质1抗体
StAR 促黄体激素诱导蛋白抗体
STK36 丝氨酸/苏氨酸激酶36融合同源蛋白抗体
S100P binding protein S100P结合蛋白抗体
SAMD14 SAMD14抗体
SMOC2 分泌模块化钙结合蛋白2抗体(平滑肌相关蛋白2)
SLC26A4 钠碘单独转运蛋白SLC26A4抗体
Sprouty 2 快速发育生长因子同源蛋白2抗体
SPNS1 SPNS1抗体
SEMA4A 跨膜蛋白SEMA4A抗体
SNAP23 突触相关蛋白23抗体
SAP97 突触相关蛋白97抗体
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SNAP29 突触相关蛋白29抗体
SNAPIN 突触相关蛋白25结合蛋白抗体
SV2B 突触泡蛋白2B抗体
SV2C 突触泡蛋白2C抗体
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SEPT6 细胞分化蛋白SEPT6抗体
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Synaptojanin 磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5G抗体
Synaptojanin 2 磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5H抗体
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Synaptogyrin 1 神经细胞囊泡循环蛋白1抗体
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SMYD4 组蛋白甲基转移酶SMYD4抗体
操作步骤 :
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
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