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文献和实验
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保存条件 :低温冷藏
保质期 :详见说明书
英文名 :Lamp kit for canine herpesvirus
库存 :100
供应商 :上海莼试
规格 :50T
犬疱疹病毒LAMP试剂盒实验步骤典型的PCR由
(1)高温变性模板;
(2)引物与模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。
其主要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
ASAM 脂肪细胞特异性粘附分子抗体
AAV5 capsid VP2 protein 腺相关病毒5抗体
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AMPK beta 2 腺苷单磷酸活化蛋白激酶β2抗体
phospho-APC1 (Ser355) 磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体
ANAPC1 细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体
phospho-AKT2 (Ser474) 磷酸化蛋白激酶B2抗体
phospho-APBB1 (Ser175) 磷酸化铁蛋白Fe65抗体
phospho-APBB1 (Ser347) 磷酸化铁蛋白Fe65抗体
phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743) 磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体
phospho-Amyloid Precursor Protein (Ser730) 磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体
phospho-ATF2 (Ser322) 磷酸化活化复制因子2抗体
犬疱疹病毒LAMP试剂盒phospho-ATF2 (Thr51) 磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-APC1 (Ser377) 磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体
ASAP1 发育分化增强因子1抗体
phospho-ASAP1 (Tyr782) 磷酸化发育分化增强因子1抗体
AKT3 蛋白激酶B3
Girdin 肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体
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操作步骤 :
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
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