转基因品系大豆G168染料法qPCR试剂盒

保存条件 ：低温冷藏

保质期 ：详见说明书

库存 ：100

供应商 ：上海莼试

规格 ：50T

转基因品系大豆G168染料法qPCR试剂盒产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。

MIG5    细胞迁移诱导因子5抗体
MTLC    致癌基因抗体
MAP4K5    丝裂原活化蛋白激酶MAP4K5抗体
MKLN1    MKLN1抗体
MAP2K1IP1    丝裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白1抗体
MPP2    MPP2蛋白抗体
MS4A14    睾丸发育相关蛋白抗体
MS4A15    MS4A15蛋白抗体
MS4A6A    四度跨膜蛋白3抗体
MAGEA12    黑色素瘤相关抗原抗体12抗体
MAGEA2    黑色素瘤相关抗原抗体2抗体
MAGEA5    黑色素瘤相关抗原抗体5抗体
Msx2    同源盒基因Msx2抗体
Phospho-MDM2    磷酸化双微体2癌基因抗体
Phospho-MDM2    磷酸化双微体2癌基因抗体
Melamine    三聚胺单克隆抗体
MAGEB1    黑色素瘤相关抗原抗体B1抗体
MCM5    微小染色体维持缺陷蛋白5抗体
MACC1    结肠癌转移相关蛋白1抗体
MMP-1    基质金属蛋白酶-1抗体
phospho-MEF2C    磷酸化肌细胞增强因子2C抗体
Phospho-MEF2A    磷酸化肌细胞增强因子2抗体
phospho-MBP    磷酸化髓鞘碱性蛋白抗体
phospho-MBP    磷酸化髓鞘碱性蛋白抗体
phospho-MYL6    磷酸化肌球蛋白轻链6抗体
phospho-P38 MAPK     磷酸化p38MAPK抗体
phospho-p38 MAPK     磷酸化p38MAPK抗体
phospho-MEF2C    磷酸化肌细胞增强因子2C抗体
phospho-MAPK8     磷酸化氨基末端激酶2抗体
MELK    蛋白激酶MPK38抗体
MGST1    微粒体谷胱甘肽S转移酶1抗体
MUC13    粘蛋白13抗体
MEPE    细胞外基质磷酸化抗体
Mast Cell Tryptase    肥大细胞蛋白酶7抗体
MAP4    微管相关蛋白4抗体
MSS1    26S蛋白酶调节亚型7抗体
MEG1    蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型4抗体
MBOAT4    脑肠肽O酰基转移酶抗体
MRG15    转录调控因子MRG15抗体
MLL5    髓系/淋巴混合谱系白血病蛋白5抗体
MPV17    T淋巴细胞成熟相关蛋白抗体
cblA    甲基丙二酸尿症cblA抗体
non-muscle Myosin IIA    非平滑肌肌球蛋白2A抗体
MMS19    DNA修复敏感性基因19抗体
C19orf28    19号染色体开放阅读框28抗体
Mammaglobin A    乳腺珠蛋白1抗体
Myoglobin    肌红蛋白抗体
MSH6    错配修复蛋白6抗体
Mammaglobin B    乳腺珠蛋白2抗体
转基因品系大豆G168染料法qPCR试剂盒MEI-1    减数分裂缺陷蛋白1抗体
MTCH1    细胞增殖诱导蛋白60产品特点：
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。 在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
 特异性荧光标记：
 TaqMan法
 TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针 相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表： 试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量 荧光PCR反应液 14µL N×14µL 酶混合物 1 µL N×1 µL 总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

实验方法步骤：
方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。      10×PCR buffer 
                  5 μl     dNTP mix （2mM）   
          4 μl     引物1（10pM） 
                2 μl     引物2（10pM） 
                2 μl     Taq酶 （2U/μl）
                1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
   1 μl      加ddH2O至 50 μl 
  视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤
典型的PCR由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。