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品系 :详见说明书
ATCC Number :人肾癌Wilms细胞;G401
细胞类型 :A类
肿瘤类型 :详见说明书
CAS号 :详见说明书
供应商 :上海西格
库存 :49
英文名 :人肾癌Wilms细胞;G401
生长状态 :贴壁生长
年限 :详见说明书
运输方式 :电询
器官来源 :详见说明书
是否是肿瘤细胞 :否
细胞形态 :详见说明书
免疫类型 :详见说明书
物种来源 :详见说明书
相关疾病 :详见说明书
组织来源 :ATCC
规格 :详见说明书
细胞培养操作规程:一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
订购信息:
产品名称 | 人肾癌Wilms细胞;G401 |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | XG-X6498 |
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞来源于一名3个月大的婴儿的肾Wilms瘤,由于该类肿瘤分类的改变,经Garvin等鉴定后发现该细胞来源于肾横纹肌样瘤。该细胞分泌肾母细胞生长因子(nephroblast growth factor,NB-GF)。
培养条件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS
传代方法 1:3传代;3~4天1次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,13;D13S317:9,14;D16S539:12;D18S51:14;D19S433:13,14;D21S11:31,32.2;D2S1338:18,24;D3S1358:16,18;D5S818:13;D7S820:11,14;D8S1179:13,14;FGA:24,27;TH01:8,9.3;TPOX:8,11;vWA:16;
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
人肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:SCYA18, DC-CK1, AMAC-1, DCCK1, MIP-4, CKb7 Human PARC/CCL18(Pulmonary Activation Regulated Chemokine) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组PARC/CCL18浓度
人血小板衍生生长因子AA(PDGF-AA)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:PDGF-AA Human PDGF-AA(Platelet Derived Growth Factor AA) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组PDGF-AA浓度
人可溶性尿激酶型纤溶酶原激活因子受体(suPAR)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:CD87 Human suPAR(soluble urokinase-type plasminogen activator receptor) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组suPAR浓度
人酸性成纤维细胞生长因子(AFGF/FGF1)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:FGF-1, ECGF, ECGF-beta, A-FGF, FGFA, ECGFA, ECGFB, FGF-Alpha, HBGF1, HBGF-1, ECGFB, GLIO703, Heparin-binding growth factor 1 Human AFGF/FGF1(Acidic Fibroblast Growth Factor 1) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组AFGF/FGF1浓度
人多药耐药相关蛋白1(MRP1)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:ABCC1, ABC29, ABCC, GS-X, MRP, MRP1, ATP binding cassette subfamily C member 1 Human MRP1(Multidrug Resistance Associated Protein 1) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组MRP1浓度
人甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:G3PDH,G3PD, GAPD Human GAPDH(Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组GAPDH浓度
流脑单重荧光PCR检测试剂盒Monobenzone36莫诺苯宗
隐孢子虫单重荧光PCR检测试剂盒Nitrendipine3956尼群地平
常见大肠埃希氏菌多重凝胶PCR检测试剂盒48(tert-Butoxycarbonyl)oxycefcapene pivoxil588
(EPEC, EHEC, ETEC, EIEC, EAEC五种致泻性大肠埃希氏菌多重凝胶PCR检测试剂盒)Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt15127
沙门氏菌单重凝胶PCR检测试剂盒48Cefcapene pivoxil hydrochloride1478164盐酸头孢卡品酯
人肾癌Wilms细胞;G401DNA Marker I(0-0bp) 0次7-Amino-methyl-cephem-carboxylic acid222523
DNA Marker II(00bp) 0次7-Acetoxy-methylcoumarin2747/5/97-乙酰氧基-甲基香豆素
DNA Marker III(0000bp) 0次7,8-Dimethoxy,3-dihydroH-benzazepin-one739427
DNA Marker IV(0000bp) 0次6β-Hydroxystigmast-en-one36426β-羟基豆甾-烯-酮
DNA Marker V(0000bp) 0次6-O-Methylcerevisterol129
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
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