DH5α Chemically Competent Cell/感受态系列/擎科生物TSINGKE

DH5α Chemically Competent Cell

高效克隆感受态，转化效率＞10⁹ cfu/μg

【产品简介】
DH5α菌株缺失核酸内切酶（endA），提高了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型（recA1）减少插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA的稳定性。lacZΔM15的存在使DH5α可⽤于蓝⽩斑筛选实验。本产品经优化的感受态制备工艺制备而成，使用pUC19质粒DNA检测，转化效率可达1×10⁹cfu/µg。


【产品特点】
重组酶缺陷型；
转化效率1×10⁹cfu/μg；
可⽤于蓝⽩斑筛选实验。

【基因型】
F^-φ80(lacZ)ΔM15Δ(lacZYA-argF)U169endA1recA1hsdR17(m_k^-，m_k⁺)supE44λ-thi-1 gyrA96 relA1 phoA

【产品组成及保存】
-83~-78℃保存6个月

【操作流程】
加入目的DNA（质粒或连接产物），轻轻混匀后进行如下步骤：


【注意事项】
感受态细胞在冰上融化；
实验操作轻柔；
请勿反复冻融。

【问题讨论】
Q1：什么是质粒的转化效率？
A1：转化效率定义为转化1 µg质粒到一定体积的感受态细胞中，所能形成的菌落的数量（clone formation unit，cfu）。但实际上，由于用于测定转染效率的质粒的分子量不同，每微克DNA所代表的DNA分子数也会有差异，因此一般情况下，转化效率测定使用的都是pBR322或pUC19等小分子量的质粒。擎科采用pUC19对转化效率进行测定。
取0.1 ng pUC19 Plasmid DNA加入至100 µL的感受态细胞中进行转化，再加入900 µL的SOC培养基（0.1 ng DNA/mL），将上述培养液稀释10倍后（0.01 ng DNA/mL）取100 µL涂布平板（0.001 ng DNA/100µL），记录菌落数。以得到200个克隆体为例计算转化效率，此时的转化效率=200 cfu/0.001 ng=2×10⁵cfu/ng=2×10⁸cfu/µg pUC19 DNA。