pClone007 Vector Kit/克隆系列/1分钟快速连接，粘性末端的PCR产物适用/克隆系列试剂/擎科生物TSINGKE

pClone007 Vector Kit

1分钟快速连接，粘性末端的PCR产物适用

【产品简介】
本产品利用拓扑异构酶Ⅰ（Vaccinia topoisomerase Ⅰ ）瞬间完成连接反应的优良特性，结合本公司独特的载体制备工艺，完美解决传统TA克隆各种缺陷，实现克隆技术的革命飞跃。 【产品特点】
5分钟快速连接；
低背景，阳性率可达95%；
无需蓝白斑筛选；
微量外源片段及长片段均适用。

【产品组成及保存】
-25~-15℃保存1年。

组分	规格（20 次）
pClone007 Blunt Vector(15 ng/μL)	20 µL
10×Topo Mix	20 µL
Super PCR Mix（Green）*	500 µL
Control Template（50 ng/µL）**	10 µL
pUC19（10 pg/µL）***	10 µL

*菌落及菌液鉴定PCR试剂，浓度为1×，为PCR与载体通用引物M13F-47，M13R-48的混合物
**阳性对照片段，用于检测目的产物的质量，大小为1 kb。
***阳性对照质粒，用于检测感受态细胞的质量，为Amp抗性

【产品应用】
本产品适用于300~5,000 bp目的片段的T-A克隆（≤300 bp建议使用TSV-007S 避免多克隆位点区域形成的发卡结构导致测序中断）。

【操作流程】  

插入片段大小 bp	最佳用量 ng
300~1000	10~50
1000~2000	50~100
2000~5000	100~200

【问题讨论】
Q1：我构建好克隆送公司测序，结果显示失败，信号中断，为什么？
A1：当片段较小（＜ 300 bp）时，建议使用 Simple 系列载体，因为当插入片段较小时，007/007B 载体上的多克隆位点区域自身形成的发夹结构可能会导致测序中断。（若在擎科测序出现测序中断或小片段使用 007/007B 载体，可在测序单备注或联系客服备注特殊结构测序）。

【实例分享】
使用007连接3 kb PCR扩增产物后转化Trelief ™ 5α Chemically Competent Cell（TSC-C01）。菌落PCR鉴定阳性率14/16。阳性菌落测序正确率100%。


本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。