产品详情
文献和实验
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库存 :大量
英文名 :Babesia gibsoni
保质期 :一年
供应商 :上海康朗生物科技有限公司
保存条件 :负20度
规格 :50次
吉氏巴贝斯虫PCR试剂盒Babesia gibsoni
产品及特点
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增吉氏巴贝斯虫,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
规格及成分
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1 mL(红盖) |
试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
试剂三 | 吉氏巴贝斯虫 PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
试剂四 | 吉氏巴贝斯虫 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) |
50 μL(黄盖) |
试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 吉氏巴贝斯虫 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性
对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
成份 | N+2 个 样品管 |
PCR 阴性 对照 |
PCR 阳性 对照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
吉氏巴贝斯虫PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
N+2个样品 DNA模板 |
各18μL | -- | -- |
PCR 阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
PCR 阳性对照(吉氏巴贝斯虫PCR阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL |
- 按下表设置 PCR 反应:
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 30 sec |
55℃ | 30 sec | |
72℃ | 40 sec | |
最后延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应,能够获得更长的反转录产物。同时,在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中,还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
上海康朗生物科技有限公司
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