circRNA测序

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产品简介
环状RNA(circular RNA, circRNA)是一类特殊的非编码RNA,呈闭合环状结构,具有进化保守性,可灵活选择两种建库方式测序,准确鉴定circRNA来源基因、miRNA结合位点以及调控基因的差异表达情况,揭示基因表达调控机制

产品优势
环状RNA不易降解,在样本中稳定存在,可准确鉴定; 根据研究目的,可灵活选择建库方式; 应用范围广,技术相对较新,有助于文章发表。

技术路线


结果展示
circRNA的长度分布
通过circRNA的长度分布图,可查看所有样本不同长度circRNA分布情况。

各染色体circRNA密度分布图
对每个样本所有比对到参考基因组的每条染色体的circRNA数目进行统计,展示每条染色体上circRNA的分布情况。

差异circRNA火山图
火山图可评估不同样本间差异circRNA的分布情况及其显著性,可深入挖掘与生物学表型性状相关的差异circRNA。

差异circRNA热图
样本之间每个比较组合都得到一个差异circRNA集,将所有集合在每个实验组样本的TPM值进行层次聚类分析,获得的热图可反映差异基因在不同实验条件下的表达模式,从而鉴定未知基因的功能或已知基因的未知功能。

GO富集分析柱状图
通过基因长度的偏好性进行估计,准确计算GO term被来源基因富集的概率,再统计被富集到每条GO term上的基因数量,获得GO富集分析柱状图,可直观展示circRNA来源基因的注释情况,深入挖掘circRNA的调控机制。

circRNA-miRNA-基因互作网络图
比较circRNA-miRNA-基因之间的竞争性网络,分析预测的靶向关系,结合ceRNA竞争性网络的原理和实验预测,绘制成互作网络图,其中包括circRNA的潜在调控效应、预测的miRNA靶标以及下游调控基因。

常见问题
Q1. circRNA是如何产生的?
A:1.内含子的反义互补序列配对,使3'端剪切供体接近5'端剪切受体,从而攻击5'端受体,形成环状结构;    2. 外显子经过跳跃剪切后,剪切片段形成内部套索结构,诱导环状结构形成,这种方式具有5'端GU富集和3'端C富集的结构特征;    3. RBP或反式因子驱动的环化。

Q2. circRNA测序主要分析哪些物种?
A:circRNA测序主要针对有参考基因组的真核生物,并且有相对完整的基因组注释信息;如果该物种没有参考基因组或者仅有拼接得到的Unigene,可能会出现circRNA预测结果不准确。

Q3.circRNA过表达构建载体有哪些注意事项?
A:首先circRNA载体需要有成环序列,还要有促进成环序列,如长链临近序列。


 

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