AAV腺相关病毒包装 – 科研级

提供商 ：派真生物

服务名称 ：病毒包装服务

AAV腺相关病毒包装服务

派真生物提供业界高质量的AAV包装服务，可按客户需求提供各类血清型定制，除常规1-9、rh10、DJ之外，还可以个性化定制Anc80等，滴度≥1E+13GC/ml，单批产量最大可超过1E+16GC，常规产量AAV可在6~9个工作日内交付。派真生物还可以按客户要求个性化定制各类载体：基因沉默（shRNA）、基因过表达、体内基因敲降、基因激活、CRISPR基因编辑、碱基编辑等。

预制AAV服务

派真生物提供特色的预制AAV服务，而且在不断增加定制种类及数量，竭尽所能满足基因治疗或基因功能科研工作者的需求。

• 每一项AAV服务都提供滴度、纯度和内毒素检验报告，让研究者用得放心
• 高滴度(≥1E+13GC/ml)、低毒性，尤其适合系统或局部注射研究
• 当天发货或6-9工作日发货。

派真生物AAV病毒包装优势

• 快速: AAV总量5E+13GC以内，6-9个工作日内交付
• 可靠: 交付滴度≥1E+13GC/m，经进口标准品校正，避免滴度虚高
• 放心: AAV纯度95%以上、内毒素<10EU/mL，可选测HPLC、电镜空壳率、支原体、rcAAV、TCID50等几十项指标
• 周到: 及时响应式AAV专业技术支持服务
• 免邮: 货物干冰低温运费均由派真生物承担
• 全面: 提供从载体设计、病毒包装和分析方法学开发一站式服务
• 价值: 从早期研究、GLP到GMP级AAV样品全价值链覆盖

 

如何选择适合纯度的AAV？

	AAV初纯浓缩液	AAV高纯浓缩液
如何选择？	应用于对AAV纯度要求不高的培养细胞水平实验。细胞实验推荐使用对大部分细胞都具有高感染能力的AAV-DJ，或偏好感染骨髓来源细胞的AAV6血清型。	高纯、高滴度AAV会带来理想的动物实验效果以及适合绝大多数培养细胞水平实验。
制备与质控	用中等生产规模生产、收获AAV后进行超速离心得到经初纯步骤的浓缩AAV（溶于DMEM培养基），以SYBR Green qPCR对AAV滴度进行精确定量，	通过超纯提取质粒、三质粒共转染HEK293细胞、浓缩AAV、超高速梯度离心纯化，并以SYBR Green qPCR对AAV滴度进行精确定量，每次测量以ATCC的AAV标准品为基准作系统校正，确保滴度在国际标准体系内，以SDS-PAGE电泳考马斯高蓝染色方式对AAV纯度进行测定。

                                 
                        

动物实验rAAV血清型推荐

 

AAV针对体外细胞的感染效力

针对体外培养的细胞，简单的选择有AAV-DJ与AAV6。AAVDJ能感染超过80%的常规培养细胞，AAV6对血液来源和其它种类细胞感染能力最强。

 

经典案例分享
案例1：MicroRNA-20b通过抑制Mfn2介导的器官间钙离子流动从而引起心肌肥大

哈尔滨医科大学药学院的研究人员通过心肌肥大的小鼠和细胞模型发现，miR-20b可以引起胞质钙离子浓度上升并导致心肌肥大，通过rAAV9-抗miR-20b载体可以逆转由miR-20b引起的心肌增厚。

图1，A：经TAC处理的小鼠和假实验小鼠的左心室EGC检测厚度；B：Mfn2水平在TAC小鼠和Ang II处理的心肌细胞中下调

图2，D,E：miR-20b水平在TAC小鼠和Ang II处理的心肌细胞中上调

参考文献：Yue Qiu,1,4 Rongchao Cheng,2,4 Chaoqi Liang,1 Yuan Yao,1 Wenhao Zhang,1 Jie Zhang,1 Mingyu Zhang,1 .“MicroRNA-20b Promotes Cardiac Hypertrophy by the Inhibition of Mitofusin 2-Mediated Inter-organelle Ca2+ Cross-Talk.”Mol Ther Nucleic Acids. 2020 Mar 6; 19: 1343–1356.

案例2：开发CRISPR系统抑制AAV免疫反应并预防和治疗败血症研究

来自匹兹堡大学（University of Pittsburgh）的Mo R. Ebrahimkhani、Samira Kiani等科学家（均为派真生物客户）通过基于CRISPR的转录调控系统来控制基因的表达，短暂抑制与产生AAV抗体相关的基因，从而抑制AAV免疫反应，让具有基因治疗功能的AAV病毒毫无阻碍地进入递送基因，直至发挥治疗作用。

参考文献：Farzaneh Moghadam ,1,2,3 Ryan LeGraw,1,2,3 Jeremy J Velazquez, 1,2,3 Nan Cher Yeo,4,5 Chenxi Xu,6 Jin Park,6 Alejandro Chavez,7 Mo R Ebrahimkhani,8,9,10,11 Samira Kiani,12,13,14,15.“Synthetic immunomodulation with a CRISPR super-repressor in vivo.”Nat Cell Biol. 2020 Sep;22(9):1143-1154.