肾上皮细胞和肿瘤原代细胞提取物

品系 ：详见说明书

ATCC Number ：肾上皮细胞和肿瘤原代细胞提取物

细胞类型 ：详见说明书

肿瘤类型 ：详见说明书

CAS号 ：详见说明书

供应商 ：上海西格

库存 ：39

生长状态 ：详见说明书

年限 ：详见说明书

运输方式 ：免费包邮

器官来源 ：详见说明书

是否是肿瘤细胞 ：否

细胞形态 ：详见说明书

免疫类型 ：详见说明书

物种来源 ：详见说明书

相关疾病 ：详见说明书

组织来源 ：详见说明书

规格 ：详见说明书

公司产品仅用于科研细胞现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

人肾上皮细胞和肿瘤原代细胞提取物是从人肾上皮细胞和肿瘤细胞中提取的，人肾上皮细胞和肿瘤细胞分别从正常人肾组织和肿瘤组织中制备。正常人肾组织和肿瘤组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。
潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。
 

产品名称	肾上皮细胞和肿瘤原代细胞提取物
英文名称	Human Kidney MatchPair: Normal Renal Epithelial Cell Derivatives and Primary Tumor Cell Derivatives
货号	XG-XＰ11037

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
实验事项：
1. 肾上皮细胞和肿瘤原代细胞提取物 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

CN1 Others Human 人 CN1 / Coactin-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 活性炭(CP,200目,粉末状,褐色)质量规格：CP,200目,粉末状,褐色Activated charcoal
大鼠雪旺细胞RSC活性炭颗粒(AR,20-50目)质量规格：AR,20-50目Activated charcoal
TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Teaspanin 8 / TM4SF3 人细胞裂解液 (阳性对照) (分析标准品,>99.5%(GC))质量规格：分析标准品,>99.5%(GC)Lauric acid
猕猴皮肤细胞;MMS7神经酸(分析标准品,≥99.0%(GC))质量规格：分析标准品,≥99.0%(GC)Nervonic acid
NCI-H460细胞，人大细胞肺癌细胞 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化),PC-12细胞 CM-R007大鼠支气管上皮细胞完全培养基100mL十五烷酸(分析标准品,≥99.5%(GC))质量规格：分析标准品,≥99.5%(GC)Pentadecanoic Acid
ICAM1 Others Human 人 ICAM-1 / CD54 人细胞裂解液 (阳性对照) 苉(升华提)质量规格：>99.5%(GC)Picene (purified by sublimation)
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA5,6,11,12-四苯基并四苯(升华提)质量规格：>99.0%(GC)5,6,11,12-Tetraphenylnaphthacene (purified by sublimation)
13. 肝脏细胞系统1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-十六氟酞菁铜(II)(以升华法化)质量规格：>98.0%(N)(T)1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-Hexadecafluorophthalocyanine Copper(II) (purified by sublimation)
CL-0075DU 145(人前列腺癌细胞)5×106cells/瓶×23,4,9,10-苝四羧酸二酐(>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)3,4,9,10-Perylenetetracarboxylic Dianhydride
小鼠胚胎成骨细胞前体细胞;MC3T3-E1 大鼠脉络膜血管细胞完全培养基 100mL苔酚葡萄糖苷；地衣二醇葡萄糖苷（标准品）质量规格：HPLC≥97%，标准品Orcinol glucosid
CCL21 Others Human 人 CCL21 / 6Ckine 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 脒shēng huà shì jì容量：1米
人细胞;Hela S3 [HeLaS3]2-溴-2-基炳酰溴 2-Bromo-2-mqthylpropionyl bromidq 0769-82-1
A-431细胞，表皮癌细胞 人耐VCR胃腺癌细胞,SGC-7901/VCR细胞 猪小肠上皮细胞;ZYM-DIEC02戊酸，英文名或英文缩写：Valeric acid，级别：CP，98%，规格：100克
tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-3E6顺丁希二酸钠250毫克2～8℃
SERPINF1 Others Mouse 小鼠 SerpinF1 人细胞裂解液 (阳性对照) 135145-90-32,5-二录本硼酸2,5-Dichloropxenylboronic acid
肾上皮细胞和肿瘤原代细胞提取物Promocell C-21060 Airway Epithelial Cell GrowthMedium, 呼吸道上皮细胞生长培养基(即用型) 500ml氯舒隆Clorsulon质量规格：>98%,BR
人星形胶质细胞裂解物HAL氯舒隆(标准品)Clorsulon质量规格：>98%,标准品
HBEGF Others Human 人 HBEGF / D 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) L-抗坏血酸-2-1酸三钠盐；Vc1酸酯钠 L-ascorbyl-2-phosphate质量规格：>95%
人结直肠腺癌细胞;SW620 [SW 620;SW-620]IBMX, 3-异丁基-1-甲基3-Isobutyl-1-methylanxthine质量规格：>99%,美国进口
HCC 94[HCC941122]细胞，子宫鳞癌细胞(高分化) 人低分化胃癌细胞,SGC7901细胞 猪肾细胞;PK(15)盐酸普鲁卡因Procaine hydrochloride质量规格：>99%,BR
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。