WB转印膜产品组合

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货号:膜产品组合

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申请样品试用,一定注明需要的产品规格(例如:0.45 NC膜/0.2 PVDF膜)

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NC 膜 :0.2、0.45
PVDF膜:0.2、0.45


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Western印迹的灵敏度主要取决于固定在膜上并可以结合一抗的蛋白总量。然而,过量的蛋白结合不一定提高WB的信号强度,可能具有相反的效果。这是因为高浓度的蛋白通过弱相互作用力自我结合,此结合力强于蛋白与膜的结合力。这意味着蛋白质/抗体复合物在洗涤时很容易从膜上洗掉。

和PVDF膜是用于Western blotting最常见的膜,有时也会用到尼龙膜。

硝化纤维素(NC膜)在多种应用中最常用到,其主要优点是背景低。硝化纤维素膜不推荐用于多次stripping(洗脱)以及reprobing(二次孵育),因为膜会变脆,干燥时难以处理。

PVDF膜具有较高的蛋白结合能力和机械强度,是蛋白免疫印迹需要stripping以及reprobing的极好选择。由于PVDF膜具有高度疏水性,因此在使用前需要将其在甲醇或乙醇中浸泡。蛋白质通过取向力和疏水作用结合到PVDF膜上。PVDF膜具有较高的蛋白结合能力,因此其背景值较高。
  • 在实验过程中需要始终戴手套或用镊子处理膜,以避免手上的蛋白污染膜。用手接触膜造成的污染会影响目的蛋白条带信号。

Amersham  Protran系列膜是高质量100%纯度硝化纤维合成产品。特点是表面积大且均匀性好。Amersham Protran膜对于蛋白质印迹、斑点印迹和其他蛋白质或核酸检测具有良好的结合性能。

Amersham Protran硝化纤维素膜具有0.1、0.2和0.45μm的孔径,Amersham  Protran硝酸纤维素膜是用于蛋白质印迹的结合基质,具有高亲和力、阻断能力和与多种检测方法(例如化学发光、显色、荧光)的兼容性等特点。
通常,小肽段的结合力随着膜孔径的减小而增加。因此,Amersham Protran 0.1和Amersham Protran 0.2都是处理小分子蛋白和多肽的良好选择。Amersham Protran 0.1膜具有0.1μm的最小孔径,对小肽(分子量<10kDa)和核酸(<300bp)具有极好的结合力,在化学发光Western印迹中背景极低。
Amersham  Protran  Premium系列膜(0.2和0.45μm孔径)保证了各种标记方法和检测技术(化学发光、荧光、比色和放射性)的高灵敏度、高分辨率和低背景。其中,低背景的特点提高了复杂样品的检测动态范围。
Amersham Protran Supported系列膜(0.2和0.45μm孔径)由硝基纤维素固定在惰性非织造支撑材料(聚酯)的两侧而组成。支撑材料不影响转印条件或结果,可使NC膜适用于二次孵育。无支撑材料的硝化纤维素在二次孵育过程中变得脆化,无法使用。

PVDF膜
Amersham  Hybond系列膜(0.2和0.45μm孔径)是硬度高且化学性质稳定的膜,是洗脱和二次孵育的极好选择。小孔径的0.2μm膜避免了小分子蛋白穿膜并可与各种分子量的蛋白较好结合。这种膜与多种用于快速脱色的溶剂相容。Amersham Hybond应浸泡在100%甲醇或乙醇中,并在使用前浸泡在超纯水或转印缓冲液中。
Amersham Hybond 0.45具有低荧光特性,因此可用于多种荧光检测方法,如CyDye、IR染料和免染胶技术。Amersham Hybond LFP系列膜(0.2μm孔径)是一种疏水的PVDF膜,适用于荧光Western检测应用,荧光背景低
且灵敏度高。这种膜必须用甲醇活化,推荐使用Amersham ECL Plex™系列发光液进行检测。Amersham Hybond SEQ系列膜(0.2μm孔径)适用于蛋白测序应用中。

Cytiva印迹膜选择指南(标黄色产品提供试用)


根据应用不同选择如下:



 

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