Taq DNA Ligase

保存条件 ：-20℃

保质期 ：N/A

英文名 ：Taq DNA Ligase

库存 ：N/A

供应商 ：Hongene/上海兆维

CAS号 ：N/A

规格 ：＞95% by SDS-PAGE

 

产品描述：Taq DNA ligase可催化双链DNA中相邻的5'-磷酸基和3'-羟基形成磷酸二酯键。NAD+是这个酶的辅助因子。

 

来源：重组大肠杆菌

 

规格：40U/μL

 

活性单位定义：1 单位指在50 μL反应体系中，45℃ 反应条件下，15分钟能使 50% 的12 bp粘性末端片段发生连接所需要的酶量。12 bp粘性末端来自于经1 μg BstEII消化后的λDNA。

 

酶存储缓冲液：10mM Tris-HCl (pH7.5, 25℃), 50mM KCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 0.1% Triton X-100 and 50% (v/v)Glyercol.

 

配套溶液：10X Taq DNA Ligase Reaction Buffer, Cat#ON-72, 200mM Tris-HCl pH7.6, 25℃, 250mM KAC, 100mM Mg(AC)₂, 10mM NAD+, 0.1% Triton X-100.

 

相关产品推荐：10X Taq DNA Ligase Reaction Buffer, Cat#ON-072; T4 DNA Ligase, Cat#ON-157; Taq DNA Polymerase, Cat#ON-007; Pfu DNA polymerase，Cat#ON-051.

操作要点：
 

注：该酶需NAD⁺作为辅助因子，在10×Taq DNA Ligase Reaction Buffer中已添加NAD⁺，为了延长NAD⁺的半衰期，应保存于-70℃.该酶在45℃-65℃范围内均有活性。

 

推荐的操作步骤：

 

1. 准备一个无污染的PCR管，按照下表加入试剂：

   

Component	Amount
Nuclease-free H2O	to 50μL
DNA	up to 1μg of DNA
10×Taq DNA ligase reaction buffer	5μL
Taq DNA ligase	2μL (80 units)

 

2. 45°C反应 15 min.
 

储藏温度：-20℃

 

质控检测：无DNase、Nickase污染

 

纯度：SDS-PAGE纯度：大于95%

参考文献：
 

1. Barany F. Proc Nat Acad Sci USA. 88, 189–193 (1991).

2. Gail Lauer, Edwin A. Rudd, Dianel L. Mckay, et al. Journal Of Bacteriology. 173, 5047-5053(1991).