寡核苷酸探针稀释液1ml

库存 ：34

英文名 ：详见说明书

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：一年

供应商 ：上海西格

保存条件 ：4°C保存

规格 ：详见说明书

特点：
1. 安全、快速、重复性好；
2. 特异性100%，灵敏度超过90%；
3. 探针性能稳定，低温保存一年以上；
4. 荧光信号强，结果判定直观可靠；
5. 操作简单，定位精准，无实验污染。
 

产品名称	寡核苷酸探针稀释液1ml
规格	100T/盒
货号	XG-Y7835

产品名称  寡核苷酸探针稀释液1ml
规格   100T/盒
产品成分 35%去离子甲酰胺； gelatin； Ficoll； SDS； Dextran sulfate；DNA等
封闭液(ISH)
准备工作：
产品仅供科研固定液：4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加氯化钠17.6g，柠檬酸三钠(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加氯化钠30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
注意事项：
寡核苷酸探针稀释液1ml由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。
下列是公司正在热销的产品：
Iloperidone  中文名：伊潘立酮  分子式：C24H27FN2O4  度：98.0%  Cellulose,Microcrystalline   100g
4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid di  中文名：甲磺酸伊马替尼  分子式：C13H20Cl2N2O2  度：98.0%  头孢苄   1g
4-(4-Aminophenyl)morpholin-3-one  中文名：  分子式：C10H12N2O2  度：98.0%  Cephalexinmonohydrate   5g              
N-(2,3-Epoxypropyl)phthalimide  中文名：  分子式：C11H9NO3  度：98.0%  晚期氧化蛋白产物 (AOPP)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装
5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid  中文名：  分子式：C5H3ClO2S  度：98.0%  转录因子 AP-1(AP-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装
组织HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定性检测试剂盒20次  2,2'-Bicinchoninic acid  中文名：2,2'-二辛可宁酸  分子式：C20H12N2O4  度：98.0%
组织HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20次  2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane  2024-88-6  中文名：2,2-双(4-氯甲酰氧苯基)丙烷  分子式：C17H14Cl2O4  度：98.0%   
组织HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定性检测试剂盒20次  2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric acid  中文名：2,2-二羟甲基丁酸  分子式：C6H12O4  度：98.0%
组织HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20次  21-Deoxyneridienone B  中文名：  分子式：C21H28O3  度：%
组织HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定性检测试剂盒20次  2-Acetyl-6-methoxynaphthalene  中文名：6-甲氧基-2-乙酰萘  分子式：C13H12O2  度：99.0%
兔子可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           8-Azaguanine  中文名：8-氮杂鸟嘌呤  分子式：C4H4N6O 
兔子可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione  中文名：  分子式：C10H9BrN4O2  度：98.0%
兔子可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  1-(4-(3-Chloropropoxy)-3-methoxyphenyl)ethanone  58113-30-7  中文名：  分子式：C12H15ClO3  度：98.0%  关键词： 
兔子可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  1-(2-Amino-5-chlorophenyl)-1-(trifluoromethyl)-3-cyclopropyl-2-propyn-1-ol  中文名：  分子式：C13H11ClF3NO  度：98.0%
兔子可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione  1265908-20-0  中文名：  分子式：C28H40O3  度：%  关键词：  抗癌; 麦角甾烷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
寡核苷酸探针稀释液1ml★蟾毒它灵 英文名称 Bufotaline 分 子 量： 444.56 CAS NO.： 471-95-4 纯 度： ≥98% 分子式： C26H36O6 性状: 白色针状结晶 规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！ 用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等
苍术苷二钾盐 英文名称 Atractyloside potassium salt 分 子 量： 802.99 CAS NO.： 102130-43-8 纯 度： ≥98% 性状: 白色粉末 规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！ 用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等 熔点: 174℃
常山乙素 英文名称 Febrifugine 分 子 量： 301.344 CAS NO.： 24159-07-7 纯 度： ≥98% 分子式： C16H19N3O3 性状: 类白色晶体 规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！ 用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等