T7体外转录试剂盒，High Yield T7 RNA Synthesis Kit，同时提供mRNA合成及QC服务

库存 ：不限

英文名 ：High Yield T7 RNA Synthesis Kit

CAS号 ：N/A

保质期 ：N/A

供应商 ：Hongene/兆维

保存条件 ：-20℃保存

产品描述：The High Yield T7 RNA Synthesis Kit与传统的体外转录反应相比，有着很高的合成量，能够多达25倍，每个反应可以合成高达210μg的RNA。

试剂盒中提供的原料：包括50个反应，20μL/反应。
 

Component	50 rxn kits	Storage
10× Reaction Buffer*	100μL	-20℃
100mM ATP Solution	100μL	-20℃
100mM GTP Solution	100μL	-20℃
100mM UTP Solution	100μL	-20℃
100mM CTP Solution	100μL	-20℃
Enzyme Mix	100μL	-20℃
Control Template(0.5μg/μL)	10μL	-20℃
DNase I (RNase-free, 1U/μL)	50μL	-20℃
Nuclease-free H2O	1mL	-20℃
Ammonium Acetate Stop Solution	1.5mL	-20℃
Lithium Chloride Precipitation Solution	1.5mL	-20℃
Gel Loading Buffer	0.5mL	-20℃

 

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操作要点：

注：10× Reaction Buffer储存在-70℃，可能会产生白色沉淀，如果有白色沉淀产生，将试剂管加热至37℃ 5min 并且充分混合使其溶解后使用。

1. 按下表中的量完成20μL反应，可根据需要按照比例放大或者减小

Component	Amount
Nuclease-free H2O	to 20μL
100mM ATP Solution	2μL
100mM GTP Solution	2μL
100mM CTP solution	2μL
100mM UTP solution	2μL
Template DNA	1μg*
10× Reaction Buffer	2μL
Enzynme Mix	2μL

*转录产量取决于模板的添加量。

2. 充分混合，37℃反应 2h。

3.（可选择）加入1μL DNase I（RNase-free），充分混合，37℃反应30min。
 

储藏温度：-20℃

质控检测：All components are tested in a functional assay as described in this procedure. A 20-μL reaction containing 1 μg of the control template DNA which codes for a ~800b transcript synthesized >150 μg of RNA after a 2 hr incubation.

参考文献：

1. Milligan JF, Groebe DR, Witherell GW, and Uhlenbeck OC (1987) Oligoribonucleotide synthesis using T7 RNA polymerase and synthetic DNA template. Nucl. Acids Res. 15: 8783–8798.

2. Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 2nd edition. (1989) editor C Nolan, Cold Spring Harbor Laboratory Press.