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文献和实验
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注册证号 :--
英文名 :Human Skin Melanoma Cells
CAS号 :--
库存 :999
供应商 :厦门逸漠生物科技有限公司
肿瘤类型 :详询
细胞类型 :悬浮生长
ATCC Number :--
品系 :人源细胞系
组织来源 :皮肤黑色素瘤
相关疾病 :黑色素瘤
物种来源 :详询
免疫类型 :详询
细胞形态 :球形
是否是肿瘤细胞 :否
器官来源 :皮肤
运输方式 :复苏发货或干冰发货(顺丰快递)
年限 :长期
生长状态 :正常
细胞介绍
该细胞由Oettgen F及其同事从一名29岁的患有广泛、快速进展性恶性黑色素瘤的白人男性患者的胸导管中分离建立的。该细胞可产生黑色素,电镜检测发现细胞中色素颗粒与自身合成和吞噬作用相关。在63%的恶性黑色素瘤患者和10%其他疾病患者体内发现了针对该细胞系的抗体。
细胞特性
1) 来源:皮肤黑色素瘤
2) 形态:球形,悬浮生长
3) 含量:>1x106 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:
(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;
(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备MEM-EBSS培养基(Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle’s Balanced Salts) (MEM-EBSS) )( MEM,GIBCO,41500034,添加EBSS),90%;优质胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为95%。
3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
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