HL-7702,【LO2】LO-2人正常肝细胞(STR鉴定)

注册证号 ：--

英文名 ：Human Normal Liver Cells

CAS号 ：--

库存 ：999

供应商 ：厦门逸漠生物科技有限公司

肿瘤类型 ：详询

细胞类型 ：贴壁生长

ATCC Number ：--

品系 ：人源细胞系

组织来源 ：肝脏

相关疾病 ：详询

物种来源 ：详询

免疫类型 ：详询

细胞形态 ：上皮细胞样

是否是肿瘤细胞 ：否

器官来源 ：肝脏

运输方式 ：复苏发货或干冰发货（顺丰快递）

年限 ：长期

生长状态 ：正常

LO-2人正常肝细胞
一、细胞介绍

L-02细胞建系鉴定于1980年。该细胞是一株正常肝细胞系，具有典型的肝细胞形态学特征，可用于多种实验研究。

二、细胞特性

1)来源：肝脏

2)形态：上皮细胞样，贴壁生长

3)含量：>1x106个/mL

4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5)规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

三、运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式

(1)干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;

(2)存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供科研使用。

四、细胞培养步骤

1.培养基及培养冻存条件准备

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091);北美胎牛血清，20%;双抗1%。

2)培养条件： 气相：空气，95%;二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

2.细胞处理

1)复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法

a.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

c.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

d.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。

下面T25瓶为例

a.细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

b.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

c.将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。