文献支持核蛋白酵母单双杂点对点验证五折

价格： ￥700 - 3000

产品详情

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提供商：武汉金开瑞生物工程有限公司

服务名称：核蛋白酵母单双杂点对点验证五折

规格：视具体情况而定，详情请咨询

　金开瑞拥有较齐全的cDNA文库，通过将已知基因作为诱饵，从选定的文库中筛选出与诱饵蛋白/诱饵序列存在特异相互作用的蛋白，材料用量少，获得全长的比例高。

技术应用
　　酵母双杂交系统因其具有灵敏性高，功能强大，适应范围广等特点，现已被广泛应用于多个研究领域。
1、将已知基因作为诱饵，在选定的cDNA文库中筛选与诱饵蛋白相互作用的蛋白；
2、一对已知蛋白相互作用研究；
3、蛋白相互作用结构域和位点的研究；
4、建立基因组蛋白连锁图。
5、酵母单杂交技术是Li在酵母双杂交的基础上发展而来的一种研究核酸-蛋白相互作用的工具，被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控，如鉴别DNA结合位点发现潜在的结合蛋白基因、分析DNA结合结构域信息等。

服务优势
采用Clontech SMART专利技术，以总RNA为模板，用SMART方法反转录成cDNA，材料用量少，获得全长的比例高。

服务流程

1、酵母单/双杂交文库构建
接收订单及样品——总RNA提取——mRNA纯化——反转录——双链cDNA合成及纯化——共转至酵母感受态细胞（改造的Y1H)——转化效率测定——文库效价测定——结果交付
2、酵母单杂交文库筛选
接收订单及样品——诱饵载体及诱饵菌株构建——自激活检测——克隆数计算——阳性克隆菌株鉴定——结果交付
3、酵母双杂交文库筛选
接收订单及样品——诱饵载体的构建——毒性检测——测定杂交效率——阳性克隆菌株鉴定——结果交付

服务内容及说明

服务项目	客户提供	最终交付
文库构建	组织/细胞	滴度在1×10⁸以上的酵母文库菌液；文库PCR鉴定结果图片（阳性率在80%左右）
文库筛选	promoter基因序列/质粒	筛选过程中的全部原始图片；筛选获得所有相互作用的猎物蛋白的测序结果

针对酵母单杂交实验结果，可作进一步验证：

服务内容	实验目的	细分	周期（工作日）
EMSA	验证启动子和蛋白互做	探针合成及标记	10
EMSA	验证启动子和蛋白互做	EMSA实验	20
双萤光素酶检测	验证启动子和蛋白互做	载体构建	10-15
双萤光素酶检测	验证启动子和蛋白互做	双萤光素酶检测	25

注：1. 双萤光素酶检测默认使用293T细胞，使用其他细胞视培养及转染难度议价；
2. 双萤光素酶检测启动子-转录因子验证默认1个转录因子 + 启动子序列WT和Mut各1个；microRNA靶基因验证默认1个microRNA + 靶序列WT和Mut各1个，超过以上组合数量请询价。

酵母双杂交

服务项目	客户提供	最终交付
文库构建	组织/细胞	滴度在1×10⁸以上的酵母文库菌液；文库PCR鉴定结果图片（阳性率在90%左右）
文库筛选	蛋白序列/基因序列/质粒	筛选过程中的全部原始图片；筛选获得所有相互作用的猎物蛋白的测序结果

针对酵母双杂交实验结果，可作进一步验证：

服务内容	实验目的	细分	周期（工作日）
Co-IP	验证蛋白互做	/	20
GST pull-down	验证蛋白互做	GST pull-down+WB/银染	20

金开瑞-提供核酸和蛋白的整体研究方案：

武汉金开瑞生物工程有限公司是一家专业致力于为全球制药企业、诊断试剂企业、科研试剂研发企业、高校和科研院所以及大型医院提供蛋白及相关研究技术服务的高新技术企业。金开瑞极其注重平台技术提升，现已有多项自主知识产权和软件著作权专利，并已通过ISO9001质量管理体系认证，2018获批“千企万人”支持计划。公司以“细胞外囊泡”研究中心、基础生物医学实验中心、蛋白抗体中心和分子生物学中心为依托，提供核酸和蛋白的整体研究方案，与众多科研单位携手开展了大量的探索项目。截止到目前，已支持客户发表科研论文达1000+篇，累计影响因子6000+。

检测分析平台——免疫学、细胞系、分子生物学检测、双荧光素酶报告基因；
基因服务平台——引物合成、基因合成、DNA提取、载体构建、定点突变；
分子互作研究平台——双萤光素酶报告系统、RNA pull down、RIP/RIP-seq、EMSA等；
蛋白表达平台——提供从基因合成到蛋白表达的一站式服务；
抗体定制平台——单/多克隆抗体、人源化抗体、基因工程抗体、双特异性抗体、修饰抗体、诊断抗体、小分子抗体、抗体对、噬菌体服务。

更多服务内容及优惠活动，详见公司主页：http://www.genecreate.cn/