RIPA Buffer (10X)15 ml

RIPA Buffer (10X)15 ml

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品牌:抚生 品牌认证

货号:FSK11818

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抗体名 :RIPA Buffer (10X)

抗体英文名 :RIPA Buffer (10X)

浓度 :1mg/1ml

应用范围 :公司产品仅用于科研

保质期 :详见说明书

目录编号 :FSK11818

库存 :100

供应商 :上海抚生

克隆性 :多克隆

保存条件 :Store at -20 °C

形态 :详见说明书

亚型 :IgG

免疫原 :详见说明书

规格 :15 ml

RIPA Buffer (10X)15 ml抗体制备过程:
1.材料与试剂
  a.提取的动物 Ig
  b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
  c.青霉素和链霉素
  d.实验动物 兔
  e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)

HSA ELISA Kit    核突触蛋白α抗体        血清白蛋白(HSA)ELISA试剂盒
SGK2 ELISA Kit    自噬相关蛋白4B抗体        血清/糖皮质激素调节激酶2(SGK2)ELISA试剂盒
GSK2 ELISA Kit    整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体        血清/糖皮质激素调节激酶2(GSK2)ELISA试剂盒
HA ELISA Kit    α-辅肌动蛋白4抗体        血凝素(HA)ELISA试剂盒
pFN ELISA Kit    碱性磷酸酶抗体        血浆纤维连接蛋白(pFN)ELISA试剂盒
PS ELISA Kit    AU1 tag标签抗体        血浆抗凝蛋白S(PS)ELISA试剂盒
PC ELISA Kit    脂肪细胞增强结合蛋白1        血浆抗凝蛋白C(PC)ELISA试剂盒
KLKB1 ELISA Kit    蛋白激酶B        血浆激肽释放酶(KLKB1)ELISA试剂盒
CETP ELISA Kit    蛋白激酶B        血浆胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒
GMP-140 ELISA Kit    血管生成素样蛋白2抗体        血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒
HO-2 ELISA Kit    血管生成素3/血管生成素4抗体        血红素氧合酶2(HO-2)ELISA试剂盒
HO-1 ELISA Kit    膜粘连蛋白 I抗体        血红素氧合酶1(HO-1)ELISA试剂盒
HO-2 ELISA Kit    膜粘连蛋白 Ⅱ抗体        血红素加氧酶2(HO-2)ELISA试剂盒
HO-1 ELISA Kit    活化转录因子1抗体        血红素加氧酶1(HO-1)ELISA试剂盒
HO ELISA Kit    水通道蛋白4抗体        血红素加氧酶(HO)ELISA试剂盒
RIPA Buffer (10X)15 mlHb-AGE ELISA Kit    活化复制因子2抗体        血红蛋白晚期糖基化终末产物(Hb-AGE)ELISA试剂盒
HB-β ELISA Kit    腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体        血红蛋白β亚基(HB-β)ELISA试剂盒
HB-α ELISA Kit    糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体        血红蛋白α亚基(HB-α)ELISA试剂盒
HbH ELISA Kit    血管紧张素Ⅱ抗体        血红蛋白H(HbH)ELISA试剂盒
HbC ELISA Kit    血管紧张素Ⅱ受体1抗体        血红蛋白C(HbC)ELISA试剂盒
Hb ELISA Kit    血管生成素-1抗体        血红蛋白(Hb)ELISA试剂盒
ANG ELISA Kit    膜粘连蛋白5抗体        血管抑素/血管稳定蛋白(ANG)ELISA试剂盒
ADAMTS-13/vWF-cp ELISA Kit    重组膜粘连蛋白5抗体        血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS-13/vWF-cp)ELISA试剂盒
VWF ELISA Kit    衔接蛋白α-Adaptin抗体        血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒
VWF ELISA Kit    凋亡蛋白活性因子-1抗体        血管性血友病因子(VWF)ELISA试剂盒
BK ELISA Kit    凋亡蛋白活性因子-1抗体        血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒
ANG ELISA Kit    三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体        血管生长素(ANG)ELISA试剂盒
Arresten ELISA Kit    载脂蛋白E抗体        血管生成抑制因子(Arresten)ELISA试剂盒
ANGPTL4 ELISA Kit    淀粉样肽前体蛋白抗体        血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒
ANGPTL3 ELISA Kit    水通道蛋白-2抗体        血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA试剂盒
Tie-2 ELISA Kit    血管紧张素原抗体        血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA试剂盒
Tie1 ELISA Kit    雄激素受体抗体        血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA试剂盒
ANG-4 ELISA Kit    细胞死亡调节蛋白抗体        血管生成素4(ANG-4)ELISA试剂盒
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。

免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗原准备:
经常使用的抗原有:偶联多肽、偶联的小分子或化合物、天然或重组蛋白等等。
对可溶性抗原而言,为了增强其免疫原性或改变免疫反应的类型、节约抗原等目的,通常采用加佐剂的方法以刺激机体产生较强的免疫应答。
多克隆抗体和单克隆抗体的区别:
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。而同一种抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。多克隆抗体是由异源抗原(大分子抗原、半抗原偶联物)刺激机体产生免疫反应,有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。
效价测定:采用琼脂扩散法。
⑴ 将血清倍比稀释,加入外周孔。
⑵ 中间孔加动物 Ig。
⑶ 37℃湿盒琼扩24 小时后观察结果。 

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