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文献和实验
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提供商 :布林凯斯
服务名称 :标记病毒提供/病毒载体与应用
顺向跨单级标记系统
背景
单纯疱疹病毒(HSV)属于疱疹病毒科α-疱疹病毒亚科成员,能够特异感染神经系统。HSV对动物感染宿主范围广,能用于解析小鼠、大鼠及非人灵长类等动物的神经环路。HSV基因组为线状双链DNA分子,约152kb,因此能够携带较大片段的外源基因。根据抗原性的差别目前把该病毒分为1型和2型。HSV-1的嗜神经元和跨神经元传播的特性使它可被开发为理想的神经环路示踪工具。HSV-1的McIntyre-B株可以逆行跨神经元传播,而H129株可以顺向跨神经元传播。
H129作为顺向跨多级突触的示踪剂已经被报道用于多种动物模型的不同神经环路研究。表达荧光蛋白的重组H129病毒可以用于标记输出性的神经网络,荧光信号的表达极大地方便了H129作为示踪剂的使用。HSV1型毒株H129(HSV-1H129)不仅能够标记中枢不同脑区之间的连接,也能标记外周与中枢不同脑区的连接。
然而,对于特定的脑区或细胞群,用跨多级示踪剂标记出的结果并不能区分出直接的一级输出网络和多级输出网络。因此,神经科学研究迫切需要顺行跨单级的示踪系统。
HSV-ΔTK-hUbC-tdTomato是在HSV-tdTomato(HSV1型毒株H129基因组整合一个tdTomato基因)的基础上敲除胸苷激酶(TK)基因而获得。因TK基因的敲除,其体内跨突触传播能力受到限制。在表达TK的辅助病毒的存在下,HSV-ΔTK-hUbC-tdTomato可以从起始神经元传播至突触后的神经元,从而标记出一个给定脑区或特定类型神经元的直接下一级受支配神经元
图1. 神经元顺向跨单级标记示意图
研究特定脑区特定类型神经元的单级输出网络。
H129作为顺向跨多级突触的示踪剂已经被报道用于多种动物模型的不同神经环路研究。表达荧光蛋白的重组H129病毒可以用于标记输出性的神经网络,荧光信号的表达极大地方便了H129作为示踪剂的使用。HSV1型毒株H129(HSV-1H129)不仅能够标记中枢不同脑区之间的连接,也能标记外周与中枢不同脑区的连接。
然而,对于特定的脑区或细胞群,用跨多级示踪剂标记出的结果并不能区分出直接的一级输出网络和多级输出网络。因此,神经科学研究迫切需要顺行跨单级的示踪系统。
HSV顺行跨单级突触病毒
HSV-ΔTK-hUbC-tdTomato是在HSV-tdTomato(HSV1型毒株H129基因组整合一个tdTomato基因)的基础上敲除胸苷激酶(TK)基因而获得。因TK基因的敲除,其体内跨突触传播能力受到限制。在表达TK的辅助病毒的存在下,HSV-ΔTK-hUbC-tdTomato可以从起始神经元传播至突触后的神经元,从而标记出一个给定脑区或特定类型神经元的直接下一级受支配神经元
图1. 神经元顺向跨单级标记示意图
应用
研究特定脑区特定类型神经元的单级输出网络。
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