嗜神经病毒/HSV/顺向跨单级 H129△TK-hUbC-tdTomato-WPRE

嗜神经病毒/HSV/顺向跨单级 H129△TK-hUbC-tdTomato-WPRE

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品牌:布林凯斯

货号:H129△TK-hUbC-tdTomato-WPRE

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英文名 :HSV

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供应商 :布林凯斯

保存条件 :-80℃冷冻保存

病毒名称:H129△TK-hUbC-tdTomato-WPRE

病毒颜色:红色;tdTomato(激发波长:554nm,发射波长:581nm

病毒用途:顺向跨单级突触系统


WPRE:土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件

HSV顺向跨单级突触系统
单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶(HSV-TK)在HSV感染神经细胞后的急性神经节复制和复发性潜伏性神经节感染中起到重要作用(Coen et al。, PNAS, 1989)。当HSV-TK缺失后,HSV-ΔTK能感染感染神经元,但是不能复制,进而失去了跨突触的能力。在表达TK 的辅助病毒的存在下,HSV-ΔTK-hUbC-tdTomato可以从起始神经元传播至突触后的神经元,从而标记出一个给定脑区或特定类型神经元的直接下一级受支配神经元。顺行一级跨突触标记系统极大地促进直接输出性神经网络的研究。

图1 神经元顺向跨单级标记示意图
 

单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus, HSV)属于疱疹病毒科、α疱疹病毒亚科,有HSV-1和HSV-2两种亚型。
HSV基因组为约152 kb的线性双链DNA,由共价连接的长片段(UL)和短片段(US)组成,每一片段均含单一序列和反转重复序列,病毒感染宿主细胞后基因组会环化。HSV基因组中近一半为非必需基因,遗传改造空间大,可将大片段外源基因或多个转基因同时引入病毒基因组(图2)。

图2. HSV病毒粒子电镜图和基因组构成

H129是一个HSV-1型病毒的临床分离株,具有特异顺向跨突触的特性。经过多年在各种动物模型的活体测试中,发现其不仅能够标记中枢不同脑区之间的连接,也能标记外周与中枢不同脑区的连接。经过改造的病毒,装入荧光蛋白后可以实现高效、稳定的顺行跨突触标记神经元网络的功能,适合于神经输出环路的顺行示踪研究。HSV感染宿主范围广,在解析大/小鼠及非人灵长类及其他各种哺乳动物和禽类实验动物的神经信息向下游输出环路的研究中极具价值。

依据实验目的的不同可以分为3类:HSV扩增子、HSV顺向跨多级突触以及HSV顺向跨单级突触系统。

应用:
1. HSV扩增子。
2. 利用HSV扩增子病毒载体可实现大片段载体基因(>5Kb)的过表达。
3. HSV顺跨单级/多级突触(见案例展示)
1) 研究大脑特定区域的全脑范围多级输出网络结构。顺行追踪感知觉系统信息从外周向中枢输入网络,从低级脑区向高级脑区的信息输出的网络结构;从高级脑区向低级脑区反馈信息输出的网络结构;
2) 神经发育过程中的神经网络变化;
3) 神经精神疾病模型中,大脑中枢及外周信息输出神经网络结构特征和异常变化;
4) 神经损伤及康复模型中,大脑中枢及外周信息输出神经网络的连接状况的损伤程度和恢复程度;
5) 追踪外周器官与中枢神经系统间的联系通路(可能会有一定程度的潜伏)。

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