免疫组化试剂盒(适用于兔/小鼠一抗)

库存 ：40

英文名 ：Immunohistochemistry Kit(Apply to rabbit or mouse primary antibody)

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海西格

保存条件 ：低温冷藏

规格 ：20次|50次

产品名称：免疫组化试剂盒(适用于兔/小鼠一抗)
英文名称：Immunohistochemistry Kit(Apply to rabbit or mouse primary antibody)
产品规格：20次|50次
发货周期：1～3天
储存条件：冷藏（2-8℃）
概述
该免疫组化试剂盒适用范围为石蜡包埋组织切片，也可用于固定后的冰冻切片。
特点
操作简便：无需太多准备，拿到试剂盒既能开展试验。重现性好：实验结果重复性高。
应用
用于免疫组织化学实验，两种包装分别可用于20张和50张切片。
使用说明
1.组织固定：在脱蜡之前，将切片60℃恒温箱中烘烤60分钟。
2.脱蜡：将切片用二甲苯浸泡10分钟，更换二甲苯后再浸泡10分钟。
3.水化：分别用无水乙醇浸泡5分钟；95%乙醇中浸泡5分钟；85%乙醇中浸泡5分钟；75%乙醇中浸泡5分钟。
4.洗涤：ddH2O浸泡5分钟，清洗3次。
5.抗原修复（煮沸法）：压力锅中加入足以淹没切片的10mmol/ml的枸橼酸盐缓冲液（pH 6.0）（配制：将复性剂溶于相应体积ddH2O中，混匀），加热至沸腾，切片置耐热塑料切片架上，放入锅中，盖好锅盖，扣上压力阀，继续加热，设置保压3min，时间到后打开放气阀放气，压力归零后开锅盖将内锅取出放置室温冷却，待溶液冷却至室温后取出切片（约30 min）。
6.洗涤：ddH2O浸泡5分钟，清洗2次，PBST浸泡5分钟，清洗2次
7.灭活酶：每张切片滴加50μl灭活酶试剂，室温避光处理15分钟。
8.洗涤：PBST浸泡5分钟，清洗3次。（第一次迅速倒掉）
9.封闭：每张切片滴加3%BSA-PBST 50 μl，湿盒中室温封闭30分钟。
10.加一抗：弃去封闭液，每张切片滴加50 μl一抗，4℃湿盒中孵育过夜或37℃ 1小时。
11.复温：次日取出切片，室温复温40分钟
12.洗涤：PBST浸泡5分钟，清洗3次。（第一次迅速倒掉）
13.加酶标二抗：每张切片滴加HRP标记的二抗（抗兔/小鼠）25μl，室温或37℃孵育30分钟。
14.洗涤：PBST浸泡5分钟，清洗3次。（第一次迅速倒掉）
15.显色（DAB法）：每张切片滴加50 μl显色液（显色液配制：85%ddH2O+ 5%DAB缓冲液+5%DAB底物+5%DAB色原，避光现配现用，按需要量配制），湿盒中显色5分钟。
16.终止显色：用蒸馏水终止显色反应。
17.复染：每张切片滴加50 μl苏木素体细胞快速染色液，染色5分钟，用蒸馏水冲洗干净。
18.脱色反蓝：将切片放入1%盐酸~乙醇中脱色3~5秒后迅速取出放入蒸馏水中终止，再放入PBST中反蓝5分钟。
19.封片：分别在75%乙醇中浸泡5分钟；85%乙醇中浸泡5分钟；95%乙醇中浸泡5分钟；无水乙醇中浸泡5分钟。用二甲苯浸泡10分钟，更换二甲苯后再浸泡10分钟。之后在切片上加中性树胶，加盖玻片。
20.观察：显微镜。
组份
复性剂（溶解前请混匀）
HRP标记的二抗（抗兔/小鼠）
免疫组化试剂盒(适用于兔/小鼠一抗)细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；⑧细胞工程.
细胞生物学研究的常用技术有哪些：
1.显微技术：包括显微观察,显微操作.
2细胞组分分析技术：离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程：细胞培养。
具有显著特点：本产品仅供科研
灵敏度高，数据可靠，重现性好
操作简便，省时省力
水溶性，不需要换液，尤其适合于悬浮细胞
无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低
为1瓶溶液，毋需预制，即开即用
适合于高通量药物筛选
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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操作步骤：本产品仅供科研
1、用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液；
2、用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞；
3、再加入适量Hanks液制成细胞悬液；
4、将待染色细胞稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）；
5、每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴，室温下染3—5min；
6、染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放高倍镜下观察；
7、死亡的细胞着浅蓝色并膨大，无光泽。活细胞不着色并保持正常形态，有光泽；
8、计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目；
9、统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率