染色质免疫沉淀检测试剂盒(ChIP检测试剂盒)

库存 ：47

英文名 ：Chromatin Immunoprecipitation(ChIP)Assay Kit

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海西格

保存条件 ：低温冷藏

规格 ：22次

染色质免疫沉淀检测试剂盒(ChIP检测试剂盒)细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；本产品仅供科研
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；⑧细胞工程.
细胞生物学研究的常用技术有哪些：
1.显微技术：包括显微观察,显微操作.
2细胞组分分析技术：离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程：细胞培养。
产品名称：染色质免疫沉淀检测试剂盒(ChIP检测试剂盒)
英文名称：Chromatin Immunoprecipitation(ChIP)Assay Kit
产品规格：22次
发货周期：1～3天
本试剂盒用于通过免疫沉淀来沉淀和目标蛋白结合的染色质片段，后通过PCR或Southern等方法来检测沉淀的染色质片段的试剂盒。通常用于检测特定的转录因子或组蛋白等基因组DNA结合蛋白是否和预期的特定基因组DNA序列在同一复合物中。
通过ChIP检测可以获得在体的(In Vivo)目标蛋白和预期基因组DNA片段是否在同一复合物中的结论。EMSA，也称gel shift获得的结果是体外的(In Vitro)目标蛋白和预期基因组DNA片段的结合结果，可以推断细胞内也发生类似的结合，但并不代表该情况在细胞内也真实发生。而ChIP的检测结果则可明确说明这种结合在细胞内是真实发生的。
本ChIP Assay Kit采用了Protein A+G Agarose，比Protein A Agarose或Protein G Agarose适合于免疫沉淀更多种类的抗体，包括mouse IgG1，IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c, rabbit IgG, rabbit and goat polyclonal Abs，以及human IgG1, IgG2, IgG3和IgG4。
本试剂盒中经过Salmon Sperm DNA预饱和的Protein A+G Agarose和目的基因组DNA的非特异性结合大大下降。
提供了预混合的对照引物(Control Primers)。可用于扩增human GAPDH的部分相应序列，引物序列为：
5'-TACTAGCGGTTTTACGGGCG-3'；
5'-TCGAACAGGAGGAGCAGAGAGCGA-3'
本ChIP Assay Kit如果用于常规的染色质免疫沉淀，共可以免疫沉淀22个样品。
产品组份：
Protein A+G Agarose/Salmon Sperm DNA————3ml
Glycine Solution(10X)————————————30ml
ChIP Dilution Buffer————————————48ml
Low Salt Immune Complex Wash Buffer————24ml
High Salt Immune Complex Wash Buffer————24ml
LiCl Immune Complex Wash Buffer——————24ml
TE Buffer—————————————————48ml
0.5M EDTA—————————————————250μl
5M NaCl——————————————————500μl
1M Tris, pH 6.5——————————————500μl
SDS Lysis Buffer—————————————10ml
Control Primers(5μM each)————————0.1ml
储存条件：4℃避光，有效期一年。
具有显著特点：
灵敏度高，数据可靠，重现性好
操作简便，省时省力
水溶性，不需要换液，尤其适合于悬浮细胞
无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低
为1瓶溶液，毋需预制，即开即用
适合于高通量药物筛选
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。本产品仅供科研
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
染色质免疫沉淀检测试剂盒(ChIP检测试剂盒)操作步骤：
1、用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液；
2、用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞；
3、再加入适量Hanks液制成细胞悬液；
4、将待染色细胞稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）；
5、每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴，室温下染3—5min；
6、染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放高倍镜下观察；
7、死亡的细胞着浅蓝色并膨大，无光泽。活细胞不着色并保持正常形态，有光泽；
8、计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目；
9、统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率
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