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库存 :30
英文名 :Anti-Collagen II Polyclonal Antibody
CAS号 :详见说明书
保质期 :详见说明书
供应商 :上海研生
保存条件 :详见说明书
规格 :瓶
注意事项:1、本试剂为强烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来,造成细胞裂解液粘稠,此时可以直接加入蛋白上样缓冲液,煮沸再离心,离心后直接上样电泳;若想测定浓度,可入加少量SDS(1%),煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂,所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物,随后离心取上清用于后续实验。
参数规格:
产品名称 | Anti-Collagen II Polyclonal Antibody说明书 |
英文名称 | Anti-Collagen II Polyclonal Antibody |
货号 | YS-D12541 |
英文名称: Anti-Collagen II Polyclonal Antibody
宿主: Rabbit
别名: Collagen II alpha 1; COL2A1; COL2A1 protein; collagen, type II, alpha 1; collagen alpha-1(II); type II collagen; alpha-1 type II collagen; alpha1 type II collagen; Col2a1; AOM; Cartilage collagen; Chondrocalcin; COL11A3; Collagen alpha 1(II) chain precursor; Collagen II alpha 1 polypeptide; Collagen type II alpha 1 (primary osteoarthritis spondyloepiphyseal dysplasia congenital); MGC131516; SEDC; CO2A1_HUMAN.
应用: WB ELISA IHC-P IHC-F ICC IF
稀释比例: WB 1:500-2000. ELISA 1:500-1000. IHC-P 1:100-500. IHC-F 1:100-500. ICC 1:100-500. IF 1:100-500.
蛋白分子量: 117kDa
保存: Store at -20°C. Avoid freeze / thaw cycles.
储存液: Buffer: PBS with 0.03% Proclin300, 50% glycerol, pH7.4.
纯化方法: Affinity purification
亚型: IgG
使用方法:
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014),使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后,细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液,混匀,充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,需分装成50~100万细胞/管,然后再裂解。(3) 充分裂解后,10000~14000 rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片;
(2) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1 mM;
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量,具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
(5) 充分裂解后,10000~14000rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
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