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文献和实验
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保质期 :一年
保存条件 :常温
供应商 :深圳市科润达生物工程有限公司
库存 :充足
规格 :25T
登革热NS1抗原检测试剂卡(传染病类)
【预期用途】
该测试卡是一种体外定性免疫色谱分析方法,用于快速检测人血,血清和血浆标本中的登革热NS1抗原。测试结果旨在帮助诊断急性登革热。
【前言简介】
登革热是一种急性病毒性疾病,它主要通过埃及伊蚊传播。登革热在临床上主要表现为:双相热、皮疹和造血抑制,还可表现出全身症状,如浑身不舒服、关节痛、肌肉疼痛和头痛,有时还可能出现极为罕见的出血性高烧,并可能导致致命性的休克。登革热主要流行于热带和亚热带地区,大概每年会发生100,000,000例。据统计,每年大概会出现500到1000万例登革热病人,同时还会出现250000到500000例登革热出血热。在2002年,据报道,30多个拉丁美洲的国家出现10000000例登革热病人,并且大多数是登革热出血热(DHF)病人。之后在2003年到2005年,在印度的一些地方也广泛流行DHF。在美国,据报道,DHF病人在1996到2002年就增加了三倍。据报道说,登革热也在夏威夷和德克萨斯州的拉雷多爆发过。由于病毒的潜在传染性,一些病毒包括登革热都被列为CDD的A类潜在传染原。登革热NS1(非结构蛋白)蛋白是一个六聚体分泌的蛋白。它是病毒RNA复制中重要的角色,它强烈的免疫原性引起抗体和补体的活性。在急性感染血液中可检测到NS1抗原。此试剂盒可检测即时感染患者血清中的NS1抗原。
【实验原理】
登革热NS1抗原检测是一种夹心固相免疫色谱法。当将样品添加到样品垫中时,它会穿过金结合物垫,并移动包被在垫上的抗NS1金结合物。
【样品采集和准备】
- 此试验使用人血清,全血或血浆。
- 从红细胞凝块中提取出血清,不能使用溶血。
- 样品采集后应尽快进行实验,不要将血清长时间放置在室温下。
- 采取静脉穿刺采血,样品在2-8℃下可保存7天,-20℃或更低温度可保存30天,想要保存更长时间,应贮存在-70℃,避免反复冻融。
- 使用前应将冻存的样品在室温下溶解。
- 如果血清是需运输的,则需根据联邦感染试剂运输法规进行包装运输。
【实验步骤】
试剂准备:
- 1X洗涤缓冲液:120ml的10X的洗涤缓冲液和1080ml的去离子水混合。充分混匀,确保完全溶解。1X的洗涤缓冲液在室温下可保存6个月,使用前应检查其是否被污染,被污染的则应丢弃。
- 微孔板:固定实验所需的微孔条,不用的应保存在密封袋内,贮存在2-8℃下至有效期。
- 酶连液的制备:120uL的100X的酶联物直接加入到12ml的酶联稀释液瓶中,充分混匀,2-8℃下可保存2周,2周后应将其丢弃,不能再用于试验。
操作步骤:
- 阳性、阴性和临界质控设置平行样,未知样品可不设置,90个试验样品可在一块板上进行检测。
- 吸取50ul的样品稀释液至相应的孔内。
- 在含有样品稀释液的孔内加入50ul的未稀释血清,混匀。
- 盖板,37℃下孵育1h。
- 每孔加入300ul的1X洗涤液,全自动洗板机洗板6次。
- 用多通道移液器每孔加入100ul的酶联物,丢弃剩余的酶联物或者是保存在2-8℃下至2周。
- 盖板,37℃下孵育30min。
- 全自动洗板机洗板6次。
- 每孔加入100ul的TMB底物液。
- 黑暗处,室温下孵育20min。
- 每孔加入50ul的终止液,不盖板,室温下放置1min。
- 酶标仪450nm处读取数据。
【质量控制】
1.质控带是一种内部试剂和程序质控。如果测试正确执行并且试剂具有反应性,则会出现。
2.良好实验室规范建议每天使用对照材料以验证设备的可靠性。该测试卡未提供的对照材料可能在市场上有售。
【期望值】
登革热NS1抗原可在发烧后的第1天到第9天在人血中循环。但是抗原水平随抗体水平的升高而迅速下降。
本译文仅供参考,详情请以原文为准。
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