神经氨酸酶抑制剂筛选试剂盒

库存 ：29

英文名 ：Neuraminidase Inhibitors Screen Kit

保质期 ：有效期一年

供应商 ：上海莼试

保存条件 ：-20℃

规格 ：100次

参数规格:

产品名称	神经氨酸酶抑制剂筛选试剂盒
英文名称	Neuraminidase Inhibitors Screen Kit
货号	CS-X14881

中文名称：神经氨酸酶抑制剂筛选试剂盒
英文名称：Neuraminidase Inhibitors Screen Kit
产品规格：100次
发货周期：1～3天
本试剂盒是一种用荧光法快速高灵敏度高通量筛选神经氨酸酶抑制剂的试剂盒。本试剂盒可以筛选溶解于水的抑制剂，也可以筛选溶解于甲醇、乙醇、DMSO的抑制剂。其它溶剂未经测试。用于96孔板检测时，一个包装的本试剂盒可以检测100个样品或标准品。
试剂盒组分：
神经氨酸酶检测缓冲液—————10ml
神经氨酸酶——————————1ml
神经氨酸酶荧光底物——————1ml
Milli-Q水———————————1.2ml
禽流感病毒在其外壳上有两种糖蛋白，一种是haemagglutinin，简称HA，另一种是neuraminidase，简称NA，也称唾液酸酶(sialidase)。目前治疗H5N1型禽流感的常见药物包括瑞士罗氏制药公司的Oseltamivir (Tamifu，达菲为其商品名)和葛兰素史克公司(GlaxoSmithKline)的Zanamivir (Relenza，瑞乐砂为其商品名)，这两种药物都是neuraminidase的抑制剂。但达菲价格昂贵，普通百姓很难承受。并且达菲能力有限，如果发生较大规模的禽流感疫情，该药物的供给量有限。另外，在一些禽流感疫情中已经发现了达菲耐受的禽流感病毒，在达菲的临床测试中就发现存在一些对达菲耐受的禽流感病毒。Zanamivir不能口服，使应用范围受到限制。因此，寻找新的神经氨酸酶抑制剂作为治疗禽流感的药物非常迫切。希望本试剂盒能有助于寻找到更好的价廉物美的禽流感药物。
试剂盒中提供了纯化的神经氨酸酶和可以被神经氨酸酶催化产生荧光的底物，并且对神经氨酸酶的用量和底物的使用量进行了优化。不仅能检测出IC50很低的抑制剂，也能检测出IC50较高的抑制剂。
注意事项：
1. 神经氨酸酶和神经氨酸酶荧光底物尽量避免反复冻融。
2. 试剂盒中所用溶液溶解后4℃保存，两天有效。如果两天内不能全部用完，建议尽早把留作以后使用的神经氨酸酶和神经氨酸酶荧光底物适当分装后-70℃保存，-20℃冻存也可，但有效期会较短。其余试剂直接-20℃或-70℃保存即可。
3. 需使用荧光酶标仪，并需自备专门用于荧光酶标仪荧光检测的96孔荧光酶标板。或使用可以检测小体积样品的荧光分光光度计。使用荧光分光光度计时参考荧光酶标板的操作方法。
4. 由于荧光检测非常灵敏，测定出来的荧光强度有时容易产生波动。一方面要避免灰尘等掉入检测孔中产生荧光干扰，另一方面所有检测最好在同一块检测板上做双份平行检测甚至三份平行检测。
储存条件：-20℃，有效期一年。

注意事项：
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
产品特点：
1.神经氨酸酶抑制剂筛选试剂盒 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方，将溶胶和结合两种功能统一，因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况，节省了需购买多种试剂盒的费用，
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
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神经氨酸酶抑制剂筛选试剂盒 PORCN蛋白(PORCN)ELISA试剂盒 0.7850 ng/mL 1,4二d4(标准品) 1,4Dichlorobenzened4
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Transferrin Receptor / TFRC / CD71 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM    25 Test 阿莫西林（标准品） Amoxicillin
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大鼠血管动蛋白(AMOT)ELISA试剂盒 英文名 AMOT ELISA Kit 4(4羰)酯(>95.0%(HPLC)) Amyl 4(4Ethoxyphenoxycarbonyl)phenyl Carbonate
CD300C 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM    25 Test 烟酰/尼克酰/维生素B3 Nicotinamide
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E3泛素蛋白连接酶CBLB(E3 ubiquitinprotein ligase CBLB)ELISA试剂盒 7.8500 ng/mL dNTP mixture溶(10 mM) dNTP mixture,10 mM
PCDHGB5  原钙粘蛋白γB5抗体 规格 0.2ml DDAB；双十二化铵 Didecyldimethylammonium bromide
AC肉汤    250(g) 杆菌肽（标准品） Bacitracin