支原体去除试剂2(100X)

库存 ：52

英文名 ：Antibiotic Solution 2(100X)

保质期 ：有效期18个月

供应商 ：上海莼试

保存条件 ：-20℃避光

规格 ：4×1.5ml

操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 支原体去除试剂2(100X) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。

参数规格:

产品名称	支原体去除试剂2(100X)
英文名称	Antibiotic Solution 2(100X)
货号	CS-X14494

中文名称：支原体去除试剂2(100X)
英文名称：Antibiotic Solution 2(100X)
产品规格：4×1.5ml
发货周期：1～3天
在细胞培养过程中，定期检测能够有效的避免支原体大量污染，但如果细胞已受支原体污染，则需对其进行及时处理，最佳处理原则为将细胞高压灭菌后丢弃，以免污染其它洁净的细胞株。若受污染的细胞比较珍贵，必须去除支原体污染，可以通过混合使用抗生素以达到目的。由于支原体无细胞壁，因此传统的抗生素一般对其无效。本品是一种基于四环素衍生物的抗生素，与另外一种基于截短侧耳素类衍生物的抗生素1（SY0543）按先后顺序联合使用，可取得良好的支原体清除效果。
使用方法
注：本品必须与SY0543联合使用才可以达到最佳的支原体清除效果。
1）使用前确保瓶盖密封，解冻至室温，轻轻漩涡混匀并用70%乙醇擦拭瓶子表面，再放到超净工作台上。
2）按先后顺序联合使用SY0543和SY0544处理细胞：
a.受污染的细胞分盘后，每10ml培养基中加入100µl SY0543溶液培养4天，期间需换液时按同等比例加入SY0543溶液。
b.4天后换液，每10ml培养基中加入100µl SY0544溶液培养3天，期间需换液时按同等比例加入SY0544溶液。
3）以上述a，b处理为一个循环，根据实际情况此循环重复2-3次。
4）处理过程中推荐使用PCR支原体检测试剂盒（SY0542）检测支原体去除效果。
储存条件：-20℃避光，有效期18个月
产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方，将溶胶和结合两种功能统一，因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况，节省了需购买多种试剂盒的费用，
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
人组蛋白H2bhistonH2b定量检测试剂盒　免疫测定
人,25二羟维生素D3,25OH2D3/DVD/DHVD3定量检测试剂盒　免疫测定
人可溶性核子κB受体活子配sRANKL定量检测试剂盒　免疫测定
人骨钙素/骨谷蛋白OT/BGP定量检测试剂盒　免疫测定
人骨特异性性酶BALPB定量检测试剂盒　免疫测定
人组HIS定量检测试剂盒　免疫测定
大鼠促卵泡素(FSH)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒　Rat FSH ELISA Kit　
大鼠雌二受体（ER)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒　Rat ER ELISA Kit　
大鼠心肽ProANP(198)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒　Rat ProANP(198) ELISA Kit　
大鼠大内皮素(BigET)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒　Rat BigET ELISA Kit　
大鼠降钙素(CT)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒　Rat CT ELISA Kit　
大鼠骨钙素(OT)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒ELISA Kit　Rat Osteocalcin(OT)ELISA Kit　
大鼠促状(TSH)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒　Rat TSH ELISA Kit　
支原体去除试剂2(100X)  卷曲螺旋结构域蛋白90A抗体 BCAP31 ELISA Kit B细胞受体相关蛋白31(BCAP31)ELISA试剂盒
常春藤苷C;Hederacoside C 订购|咨询 规格 20mg
 卷曲螺旋结构域蛋白71抗体 BCR ELISA Kit B细胞受体(BCR)ELISA试剂盒
刺五加叶中;Hederasaponin 订购|咨询 规格 20mg
 卷曲螺旋结构域蛋白47抗体 Bcl6 ELISA Kit B细胞淋巴瘤子6(Bcl6)ELISA试剂盒
白屈菜红;Chelerythrine 订购|咨询 规格 20mg
 卷曲螺旋结构域蛋白37抗体 BCGF ELISA Kit B细胞生长子(BCGF)ELISA试剂盒
白皮杉醇;Piceatanl 订购|咨询 规格 20mg
 卷曲螺旋结构域蛋白17抗体 Bcl3 ELISA Kit B细胞淋巴瘤子3(Bcl3)ELISA试剂盒
阿奇;Azithromycin 订购|咨询 规格 100mg
 卷曲螺旋结构域蛋白58抗体 Bcl-2 ELISA Kit B细胞淋巴瘤子2(Bcl-2)ELISA试剂盒
恶喹;品型;标准品;有证书 订购|咨询 规格 0.25g
 卷曲螺旋结构域蛋白94抗体 Bcl-xl ELISA Kit B细胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)ELISA试剂盒
松;品型;标准品;有证书 订购|咨询 规格 0.1g
 卷曲螺旋结构域蛋白82抗体 BLNK ELISA Kit B细胞连接蛋白(BLNK)ELISA试剂盒
野麦畏;品型;标准品;有证书 订购|咨询 规格 0.1gSalmonella沙门氏菌抗体（多型）进口/国产人促状腺素(TSH)ELISA试剂盒84776-26-1
ADAM11去整合素样金属蛋白酶11抗体进口/国产人皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒
HistoneH3(TriMethylK4)三化组蛋白H3抗体进口/国产人雌二醇(E2)ELISA试剂盒
MAGEA11黑色素瘤相关抗原11抗体进口/国产人睾(T)ELISA试剂盒
ADAMTS12整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体进口/国产人游离睾(F-TESTO)ELISA试琀䴀最爀⸀攀砀攀
注意事项：
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。