WB化学发光法检测试剂盒(人IgG)

库存 ：50

英文名 ：ECL Western Blotting Detection Kit(Human IgG)

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海莼试

保存条件 ：详见说明书

规格 ：1kit

中文名称：WB化学发光法检测试剂盒(人IgG)
英文名称：ECL Western Blotting Detection Kit(Human IgG)
产品规格：1kit
发货周期：1～3天
SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，加入发光底物后，能让胶片感光。经显影和定影后，可以在胶片上显示出条带（抗原所在位置）。
产品内容：
封闭试剂：30g(可配制400ml)。
10倍浓缩抗体稀释液，50ml。
HRP标记二抗，0.3ml，效价1:500～1000。
ECL显色液，25ml A液 + 25ml B液。
保存条件：-20℃避光密闭保存，有效期一年。若经常使用，可将封闭试剂，抗体稀释液和ECL显色液存放于 2-8℃以方便使用。
操作步骤(仅供参考)：
常规电泳转膜后：
1．清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2．按5g封闭试剂加100ml双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜放入封闭液内，置摇床孵育，室温封闭30min。用TBS-T缓冲液（pH7.6）洗膜，室温漂洗3次每次5min。
3．将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml 10×抗体稀释液加入90ml双蒸水，混匀，可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4．用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
  注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5．用TBS-T 缓冲液（PH7.6）洗膜，室温漂洗3次每次5min。
6．用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量，按10ml抗体稀释液加入15μl HRP标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口，37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天
再使用一次。
7．用TBS-T缓冲液（pH7.6）洗膜，室温漂洗3次每次10min。
8．根据用量，取ECL发光液A、B等量混匀，加在膜正面，暗室显色1～5分种。倾去显色液，小心用纸吸去显色液，在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片，做好标记，轻轻的放在膜上，显色30秒到1分钟，取出胶片浸入显影液中，观察显色情况，再放入定影液中1分钟。根据条带强弱，再次感光时可减短或者加长感光时间（从5秒到30分钟）以期达到理想结果。
注意事项：
1．请根据一抗来源选择试剂盒。
2．可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长最终漂洗次数与时间。如果条带过弱，可增加抗体浓度，可延长抗体孵育时间或加长感光时间。
3．TBS-T（0.01M，PH7.6）配制方法：称取NaCl 8.5g，Tris 1.21g，用800ml双蒸水溶解，用盐酸调pH到7.6，再加入0.5ml Tween-20，用双蒸水 加至1000ml，混匀即可。（也可按照自己的配制习惯来配制）
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。

注意事项：
    WB化学发光法检测试剂盒(人IgG) 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
以下是公司正在热销的产品：
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4-Fluorobenzoic acid对50毫克高，99%
4-Fluorobenzaldehyde对100克50%，末
4-Dimethylaminobenzal rhodanine玫瑰红银试剂25克ACS，90%
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PCT(MouseProcalcitonin)ELISAKit小鼠降钙素原100439-200301
IAA(Mouseinsulinautoantibodies)ELISAKit小鼠胰岛素自身抗体100440-200301
GP210(MouseAnti-glucoprotein210)ELISAKit小鼠抗核膜糖蛋白210抗体100441-200401
WB化学发光法检测试剂盒(人IgG) MethicillinSodium(AS)AIMP3/p18抑癌蛋白AIMP3抗体ELISAKitforProteinTyrosinePhosphataseReceptorTypeN(PTPRN)
MethimazoleCABLES1细胞周期蛋白依赖性激酶CABLES1抗体ELISAKitforCyclophilinB(CYPB)
L-MethionineCDCA3细胞分裂周期相关蛋白3抗体ELISAKitforInhibinBindingProtein(INHBP)
MethocarbamolDBF4AS期激酶活化蛋白DBF4A抗体ELISAKitforLysozyme(LZM)
MethohexitalCIVSAP/SerumAmyloidP血清淀样蛋白P成份抗体ELISAKitforInterferonBeta(IFNb)
MethotrexateMNAT1细胞周期G1的相互作用蛋白抗体ELISAKitforRibonucleaseA3(RNASE3)
CDC2L5细胞分裂周期2样蛋白激酶5抗体ELISAKitforAngiotensinIIReceptor1(AGTR1)
PICK1蛋白激酶Cα相互作用蛋白1抗体ELISAKitforMajorBasicProtein(MBP)