即用型免疫组化试剂盒(小鼠源一抗)(冰冻切片/石蜡切片)

库存 ：57

英文名 ：Instant Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Mouse IgG

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海莼试

保存条件 ：详见说明书

规格 ：80T|160T

操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 即用型免疫组化试剂盒(小鼠源一抗)(冰冻切片/石蜡切片) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。

参数规格:

产品名称	即用型免疫组化试剂盒(小鼠源一抗)(冰冻切片/石蜡切片)
英文名称	Instant Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Mouse IgG
货号	CS-X14090

中文名称：即用型免疫组化试剂盒(小鼠源一抗)(冰冻切片/石蜡切片)
英文名称：Instant Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Mouse IgG
产品规格：80T|160T
发货周期：1～3天
本试剂盒采用SABC系统，适用一抗为小鼠IgG，标本为培养细胞或冰冻切片的免疫组化。SABC 是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素对生物素分子有极高的亲和力，等电点 pI=6.0~6.5，对组织和细胞的非特异吸附很低。根据研究，大量的过氧化物酶可以保证 SABC 具有很高的敏感性。所以SABC兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。
冰冻切片和培养细胞做免疫组化时，由于内源性抗体的抗原性完好保存，一般免疫组化试剂盒就会碰到严重的背景染色问题，尤其是酮固定的标本。本试剂盒所用的二抗是生物素标记的抗小鼠IgG，具有高度的特异性，不和小鼠以外任何抗体起反应，所以不会因二抗引起背景染色。此外，本试剂盒也能用于小鼠标本石蜡切片的免疫组化，背景染色优于普通试剂盒。
保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。
冰冻切片染色步骤：
1. 取出切片，浸于 PBS 中复温30分钟。
2. 灭活。30%H2O2 1 份+纯甲醇 50 份混合,室温浸泡10分钟，以灭活内源性过氧化物酶。蒸馏水洗1-2 次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。5%BSA封闭液 37℃孵育30分钟，甩干，勿洗。
5. 滴加一抗(小鼠IgG)，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗，5分钟×3次。
6. 滴加生物素标记抗小鼠IgG，37℃孵育30 分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
7. 滴加 SABC，37℃孵育30分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
8. 显色液显色，镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)或AEC(ZN1963)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染，染色时间为0.5-2分钟。脱水，透明。
10. 选用中性树胶，水溶性封片剂(ZN2946)或其他适当的封片剂封片。
产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方，将溶胶和结合两种功能统一，因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况，节省了需购买多种试剂盒的费用，
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
3Pyridinol Noxide3羟N物6602284
Dicyclohexyl phthalate邻二二环84617
HPHENH2L酰5241587
BETAINE CITRATE柠檬甜菜17671500
Sodium selenite pentahydrate亚(五水)26970821
3,5Dibromo2methylpyridine23,5二溴38749870
3(Trifluoromethoxy)benzoic acid3(三)1014819
oAnisidine邻90040
Triethyl orthobenzoate原三1663612
2,4Dihydroxybenzophenone2,4二羟二131566
LArginine 2oxopentanedioateL精 alpha二 (2:1)5256768
2Nitropropane279469
TRIMETHYLHEXAMETHYLENEDIAMINE三六亚25513648
(R)4AMINO3(4FLUOROPHENYL)BUTANOIC ACID(R)43(4)741217334
Baicalin7glucoside木蝴蝶苷A31567756
奥卡平 28721075 订购|咨询  规格： 100mg
溶血脂酰胆  订购|咨询  规格： 25mg/支
必利  订购|咨询  规格： 100mg
关黄柏  订购|咨询  规格： 0.5g
芭蕉根  订购|咨询  规格： 1g
上一支蒿  订购|咨询  规格： 1.0g
（托司琼质）  订购|咨询  规格： 50mg
利福S  订购|咨询  规格： 100mg
D木糖 31178708 订购|咨询  规格： 50mg
桃仁  订购|咨询  规格： 1g
  订购|咨询  规格： 100mg
比卡鲁  订购|咨询  规格： 100mg
甘草二 68797353 订购|咨询  规格： 100mg
γ亚  订购|咨询  规格： 0.2ml
L谷酰  订购|咨询  规格： 600mg
即用型免疫组化试剂盒(小鼠源一抗)(冰冻切片/石蜡切片) T3 RNA聚合酶Compound KMIG6/ERRFI1  有丝分裂原诱导6抗体Lptn/LTN/XCL1(Human lymphotactin) ELISA Kit  淋巴细胞趋化子小鼠质蛋白酶抑制子3(TIMP-3)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产T7 RNA聚合酶(−)-Gallocatechin gallate；GC特价供应EXTL  外生性骨疣样蛋白2抗体ANG-4(Mouse Angiopoietin 4) ELISA Kit  小鼠血管生成4大鼠质蛋白酶抑制子3(TIMP-3)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产T4 DNA聚合酶(−)-Catechin gallate；CG现货促销FBXO31  F-box蛋白家族FBXO31抗体CaN ELISA Kit   大鼠钙调酶质蛋白酶抑制子4(TIMP-4)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产T7 DNA聚合酶对照品特价促销FLCN/BHD/Folliculin  卵巢滤泡激抗体（BHD综合征）BMPR- II (Mouse Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit  小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ小鼠质蛋白酶抑制子4(TIMP-4)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产0.2mlAnti-CENPA/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠着丝粒蛋白A抗体IgG121083-9901
0.2mlAnti-Phospho-CENP-A(Ser7)/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷化着丝粒蛋白A抗体IgG121084-201003
0.2mlAnti-Phospho-HER3(Tyr1197)/FITC荧光素标记磷化HER3受体抗体IgG121085-9901
0.2mlAnti-Phospho-HER3(Tyr1222)/FITC荧光素标记磷化HER3受体抗体IgG1210
注意事项：
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。