DAB显色试剂盒(紫蓝色)(WB专用)

库存 ：23

英文名 ：详见说明书

保质期 ：一年

供应商 ：上海莼试

保存条件 ：-20℃避光冷冻保存

规格 ：1盒

操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) DAB显色试剂盒(紫蓝色)(WB专用) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。

参数规格:

产品名称	DAB显色试剂盒(紫蓝色)(WB专用)
英文名称	详见说明书
货号	CS-X14015

中文名称：DAB显色试剂盒(紫蓝色)(WB专用)
英文名称：
产品规格：1盒
发货周期：1～3天
试剂盒中的内容及包装规格：
显色剂 A：DAB×40倍浓缩液,3ml。
显色剂B：H2O2×40倍浓缩液,3ml。
显色剂C：TBS×40倍浓缩缓冲液(含=化镍)，3ml。
产品保存：-20℃避光冷冻保存一年。
DAB是过氧化物酶最重要的显色剂之一，在加金属镍盐的情况下，显色呈鲜艳的紫蓝色，可用于 Western Blotting，免疫组化及各种斑点检查法。本试剂盒采用液体性滴瓶包装，使用方便，并且减少了接触有潜在毒性的DAB。
使用方法:
1．DAB显色:使用DAB显色试剂。按每2ml蒸馏水加显色剂 A，B，C各 1滴，混匀。
2．混匀后加至膜上。
3．室温显色。一般显色1－30分钟。若无背景出现则可继续显色。显色后用蒸馏水洗涤以终止反应。
4．观察，照相。
产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方，将溶胶和结合两种功能统一，因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况，节省了需购买多种试剂盒的费用，
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
Econazole nitrate咪唑100uBR
EB溴化10毫升高
EACA6-己1克BR，99%
EAA酯10克CP
E-64E-64蛋白酶抑制剂500毫克BR，500u/g
Dysprosium(III)oxide三二镝25毫升CP，95%
Dyclonine hydrochloride1-(4-)-3-(1-)-1-盐盐50UBR，猪心,95%
D-XyluloseD(+)木糖100U高，
D-Xylose木糖5毫克超，97%
D-Val-Leu-Lys PNA•2HC1D-缬酰-L-亮酰-L-赖酰对二盐盐1克BR，
D-Valine methyl ester hydrochlorideD-缬酯盐盐1克BR，
D-ValineD-2--3-5克BR，99%
dUTP，4Na2'-脱尿嘧核苷-5'-三四盐500毫克0.98
dUTP，3Na2'-脱尿嘧核苷-5'-三三盐5克高，
dUMP2-脱尿嘧核苷-5'-单二盐1克高，
DAB显色试剂盒(紫蓝色)(WB专用) 48T/96T进口、国产1620Dichlorphenamide检查
Dienestrol48T/96T进口、国产1620Dichlorvos(AS)检查
Diethanolamine48T/96T进口、国产1620Diclazuril含量测定
DiethylcarbamazineCitrate48T/96T进口、国产1620HPLC法含量测定用
DiethyleneGlycol48T/96T进口、国产1620DiclofenacPotassium检查
DiethylPhthalate48T/96T进口、国产1620DiclofenacSodiumHPLC/UV法含量测定
48T/96T进口、国产1620含量测定0.2mlAnti-B7-H4/FITC荧光素标记B7H4抗体IgG111668-200401
0.2mlAnti-BACE/ASP2/FITC荧光素标记β分泌酶抗体IgG111669-
0.2mlAnti-Bad/FITC荧光素标记相关死亡促进因子Bad抗体IgG111670-200503
0.2mlAnti-Bad/FITC荧光素标记相关死亡促进因子Bad抗体IgG111671-200602
0.2mlAnti-Phospho-Bad(Ser112)/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷化相关死亡促进
注意事项：
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。