双显色抗山羊IgG免疫组化试剂盒CY3和过氧化物酶

库存 ：56

英文名 ：Double chromogenic Immunofluorescence kit for goat IgG(Cy3&POD)

保质期 ：一年

供应商 ：上海莼试

保存条件 ：4℃保存应避免冷冻

规格 ：1ml|2ml|5ml

注意事项：
1. 双显色抗山羊IgG免疫组化试剂盒CY3和过氧化物酶 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

参数规格:

产品名称	双显色抗山羊IgG免疫组化试剂盒CY3和过氧化物酶
英文名称	Double chromogenic Immunofluorescence kit for goat IgG(Cy3&POD)
货号	CS-X14048

中文名称：双显色抗山羊IgG免疫组化试剂盒CY3和过氧化物酶
英文名称：Double chromogenic Immunofluorescence kit for goat IgG(Cy3&POD)
产品规格：1ml|2ml|5ml
发货周期：1～3天
本试剂盒是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍，兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。CY3 比传统上的荧光更具有亲水性，因而不会因疏水性而引起非特异性吸附或聚合，从而背景更低。而且其敏感性和稳定性都更好。CY3 在 554nm 激化，在 568-574nm 发射荧光，呈鲜红色。免疫组化双显色试剂盒采用 CY3+过氧化物酶 POD 标记的链酶亲和素（SABC-CY3+POD），用户根据实验需要，可在同一张切片上用两套显示系统观察。
保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。
石蜡片染色步骤：
1. 石蜡切片，常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性,PBS冲洗,5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。滴加用稀释后的正常山羊血清封闭液(稀释比 1:10)，37℃孵育30分钟，甩干，勿洗。
5. 滴加一抗(山羊IgG)，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗，5分钟×3次。
6. 滴加生物素化兔抗山羊IgG，37℃孵育30 分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
7. 滴加 SABC-Cy3(参考效价1:100)或SABC-POD(参考效价1:100)，37℃孵育30分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
8. 显色液显色，镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染，染色时间为0.5-2分钟。选用中性树胶，水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
10. 结果观察。荧光显微镜下有黄绿色颗粒者为阳性染色。普通光学显微镜下有棕黄色颗粒者为阳性染色。
产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方，将溶胶和结合两种功能统一，因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况，节省了需购买多种试剂盒的费用，
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
CBZ-L-PheN-羰-L-1克99%
CBZ-L-Gly羰甘100克99%
CBZ-L-ArgN-羰-L-精100克BR，98.5%
CBZ-D-Valine羰-D-缬10克BR，99%
CBZ-D-TrpN-羰-D-色10克
CBZ-D-GluN-羰-D-谷100克
CBZ-CL酯100克BR，
CAT化酵素100克BR，类型III，25u/mg
Castor oil蓖麻油10克BR，99.9%
Casein Na salt酪蛋白100毫克BR，200u/mg，末
Casein酪蛋白10克超，1200u/mg，体
Carvacrol香荆芥100克AR，99%
Carrageenan角叉胶5盒CP，
Carmine虫红1克BR，99%
Carboxypeptidase Y(Yeast)羧肽酶Y（酵母）100克细胞培养级，85%0.2mlAnti-CCL1/I-309/TCA3/FITC荧光素标记嗜粒细胞趋化蛋白CCL1抗体IgG111871-201001
0.2mlAnti-CCL3/MIP-1Alpha/FITC荧光素标记巨噬细胞炎性蛋白1α抗体IgG111872-201001
0.2mlAnti-CCL4/MIP-1Beta/FITC荧光素标记巨噬细胞炎性蛋白1β抗体IgG111873-201001
0.2mlAnti-CCL5/RANTES/FITC荧光素标记调节活化的正常T细胞表达和分泌的因子IgG111876-201
双显色抗山羊IgG免疫组化试剂盒CY3和过氧化物酶 BOC-L-甘4’-O-glucopyranosyl-5-O-ADFP  脂肪组织分化相关蛋白抗体ESF(Human erythropoiesis stimulating factor) ELISA Kit  红细胞刺激子兔子白介2(IL-2)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产BOC-L-异亮methylvisamminol特价供应LMP2A  EB病LMP-2A蛋白抗体ANG- II (angiotension II ) ELISA Kit  大鼠血管紧张Ⅱ白介2可溶性受体α链(IL-2sRα)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产BOC-D-亮Cephaeline hydrochloride现货促销ADAM2  去整合样蛋白酶2抗体Mouse reduced glutathione,GSH ELISA Kit  小鼠还原型谷胱甘肽小鼠白介2可溶性受体α链(IL-2sRα)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产BOC-L-酪Jatrorrhizine Hydrochloride特价促销MLCK  肌球蛋白轻链激酶抗体sFAS/Apo-1 (Rabbit soluble Factor-related Apoptosis) ELISA Kit  兔可溶性凋亡相关子大鼠白介2可溶性受体α链(IL-2sRα)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。