彩色预染高分子量蛋白质标准(1020次)

库存 ：20

英文名 ：详见说明书

保质期 ：一年有效

供应商 ：上海莼试

保存条件 ：-20℃保存

规格 ：100μl

注意事项：
1. 彩色预染高分子量蛋白质标准(1020次) 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

参数规格:

产品名称	彩色预染高分子量蛋白质标准(1020次)
英文名称	详见说明书
货号	CS-X13930

中文名称：彩色预染高分子量蛋白质标准(1020次)
英文名称：
产品规格：100μl
发货周期：1～3天
产品保存：-20℃保存，一年有效。
产品特点：
条带窄，易辨认。
颜色稳定。
明亮的参考条带。
宽分子量范围。
即用型 一可直接凝胶上样。
产品应用：
监控蛋白的SDS-聚丙酰胺凝胶电泳迁移。
监控免疫印迹杂交的蛋白转膜效率。
SDS-聚丙酰胺凝胶电泳和免疫印迹杂交确定蛋白大小。
产品说明：
预染蛋白 Ladders/marker 设计用于监控蛋白的SDS-聚丙酰胺凝胶电泳分离、验证免疫印迹时蛋白转移至 PVDF、尼龙和硝酸纤维膜的效率、粗略鉴定蛋白大小等应用(1-3)。这些预染的蛋白分子量标准由预染的原核生物重组蛋白组成，是预染的天然蛋白的混合物。彩色预染高分子蛋白质 marker 是一个四色的分子量标准，含有 10 种蛋白，分子量范围为10 - 260 kDa。四种不同的发色团与蛋白结合产生明亮的彩色分子量条带，带型容易记忆。
使用方法：
1.室温或37℃融化 Ladder几分钟，确保试管中的固体完全溶解，不要煮沸。
2.轻轻混匀，确保溶液完全混匀。
3.上样:
小凝胶：5μl/泳道，凝胶厚度 0.75-1 mm。
大凝胶：10μl/泳道，凝胶厚度 1-1.5 mm。
产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方，将溶胶和结合两种功能统一，因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况，节省了需购买多种试剂盒的费用，
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
Ethyl 3hydroxybutyrate3羟5405414
STRONTIUM 2,4PENTANEDIONATE酰锶12193474
1'Acetonaphthone1酰941980
Methyl 5thiazolecarboxylate5噻唑14527447
2(tertButyl)4,6dimethylphenol2,4二6叔1879090
Methyl Lthreoninate hydrochlorideL苏39994757
NA肉汤琼脂
Diethyl chlorophosphate二814493
Fast Blue BB固蓝 BB120003
Ethlenethiourea脲96457
Tritylamine三5824408
transZeatinriboside玉米素核苷6025532
2Amino4chloropyrimidine24嘧啶3993780
HALAOIPR HCLL异39825337
(R)()Methyl mandelate(R)()扁桃20698913
NP40 Lysis Buffer　含量：≥98%　规格：10mg/支
核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒　含量：≥98%　规格：20mg/支
Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit　含量：≥98%　规格：20mg/支
酶抑制剂　含量：≥98%　规格：20mg/支
Phosphatase Inhibitor Cocktail　含量：　规格：5mg/支
酰　含量：≥98%　规格：10mg/支
PMSF　含量：≥98%　规格：5mg/支
PVP抗荧光淬灭封　含量：≥ 98%　规格：20mg/支IL-10ELISAKIT大鼠白介素-10小鼠E选择素（E-Selectin）ELISAkit原装、分装含量测定
IL-11大鼠白介素-11小鼠红细胞生成素(EPO)原装、分装含量测定
IL-12大鼠白介素-12小鼠噬性细胞趋化因子-2(Eotaxin-2)原装、分装含量测定
IL-13大鼠白介素-13小鼠噬性细胞趋化因子(Eotaxin)原装、分装鉴别
IL-15大鼠白介素-15小鼠表皮细胞生长因子(EGF)原装、分装含量测定
彩色预染高分子量蛋白质标准(1020次) AmiodaroneRelatedCompoundE48T/96T进口、国产1620AmikacinHPLC≥98%
AmiodaroneRelatedCompoundH48T/96T进口、国产1620AmilorideHydrochlorideHPLC≥98%
Amitraz48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
AmitriptylineHydrochloride48T/96T进口、国产1620AminobenzoatePotassiumHPLC≥97%
48T/96T进口、国产1620AminobenzoateSodiumHPLC≥98%
48T/96T进口、国产1620AminobenzoicAcidHPLC≥98%
AmlodipineBesylate48T/96T进口、国产1620AminobutanolHPLC≥98%
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。