阳性对照蛋白(组织细胞)样本

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英文名 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海莼试

保存条件 ：4℃保存一周有效,-20℃长期保存三个月有效

规格 ：100μl

参数规格:

产品名称	阳性对照蛋白(组织细胞)样本
英文名称	详见说明书
货号	CS-X13928

中文名称：阳性对照蛋白(组织细胞)样本
英文名称：
产品规格：100μl
发货周期：1～3天
产品规格：100μl总蛋白含量200μg
产品保存：4℃保存一周有效,-20℃长期保存三个月有效
产品说明：
最大程度的保证组织及细胞内蛋白的活性，避免组织及细胞样本在处理过程中受到各种酶的影响，在裂解过程中加入了多种酶抑制剂；制备过程在低温下进行，避免由于人为因素而造成降解，抽提后的蛋白均做定量，达到标准再变性保存。所有样本均在发货一周之内处理，样本内含有 SDS-PAGE 上样缓冲液(2×)，总蛋白含量达到 200μg。
使用方法：
样本均已变性，可立即使用，使用前 100℃水浴 3-5分钟效果更佳。如若发现样本内有不溶物系样本制作完成后保存造成，不会影响实验，使用前可置于100℃水浴 3-5分钟充分溶解。

注意事项：
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
产品特点：
1.阳性对照蛋白(组织细胞)样本 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方，将溶胶和结合两种功能统一，因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况，节省了需购买多种试剂盒的费用，
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
Fenofibrate非诺贝特49562289
Emodin大黄素518821
2(TRIFLUOROMETHYL)PHENYL ISOCYANATE间三异140957
Propoxur残杀威114261
1,8DIBROMONAPHTALENE1,8二溴17135749
Ammonium benzenesulfonate铵19402643
2METHYL4NITROPHENOL2499536
3Azetidinecarboxylic acid3羧环36476785
Phenylephrine hydrochloride去61767
CHROMIUM POTASSIUM SULFATE15244389
PHOSPHATE STANDARD无水二14265442
D()ArginineD精157062
TRINHEXYLAMINE三102863
NA阳离子树脂
3Chloropropiononitrile3542767
Methyl Green Staining Solution　含量：≥ 98%　规格：20 mg/支
绿派洛宁染色　含量：≥ 98%　规格：20 mg/支
Methyl GreenPyronin Staining Solution　含量：≥ 98%　规格：20 mg/支
非变性非还原性蛋白上样缓冲(5X)　含量：≥ 98%　规格：10mg/支
Native Gel Sample Loading Buffer(5X)　含量：≥98%　规格：10mg/支
中性红染色　含量：≥98%　规格：20mg/支
Neutral Red Staining Solution　含量：≥98%　规格：10mg/支
NP40裂解　含量：≥98%　规格：10mg/支IL-1Alpha大鼠白介素-1α小鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)原装、分装含量测定
IL-1Beta大鼠白介素-1β小鼠gp130原装、分装含量测定
IL-2大鼠白介素-2小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)原装、分装含量测定
sIL-2R大鼠可溶性白介素-2受体小鼠粒细胞克隆刺激因子(G-CSF)原装、分装含量测定
IL-3大鼠白介素-3小鼠Fractalkine原装、分装含量测定
阳性对照蛋白(组织细胞)样本 AminocaproicAcid48T/96T进口、国产1620AlmotriptanMalateUV≥98%
4-Aminophenol48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
2-Amino-5-chlorobenzophenone48T/96T进口、国产1620AlphaprodineHydrochlorideCIIHPLC≥98%
Aminoglutethimide48T/96T进口、国产1620AlprazolamCIVHPLC≥98%
m-Aminoglutethimide48T/96T进口、国产1620AlprazolamRelatedCompoundAHPLC≥98%
AminohippuricAcid48T/96T进口、国产1620AlprostadilHPLC≥98%