实时荧光定量PCR(RealTime PCR)技术服务

服务名称 ：实时荧光定量PCR(RealTime PCR)技术服务

提供商 ：上海瓦兰生物

规格 ：一个样本

实时荧光定量PCR(RealTime PCR)技术服务

实时荧光定量PCR技术即是在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR避免了传统PCR以终产物检测定量产生的偏差，提高实验的重复性。该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化；比较不同组织的 mRNA表达差异；验证基因芯片，siRNA干扰的实验结果等。

SYBR Green荧光染料法

SYBR Green是一种DNA结合染料，能非特异地掺入到双链DNA中去。在游离状态下，它不发出荧光，但一旦结合到双链DNA中以后，便可以发出荧光。它的最大优点就是可以与任意引物、模板相配合，用于任意反应体系中。从经济角度考虑，它也比其它的探针的价格要便宜得多。但由于它能与所有的双链DNA结合，所以一旦反应体系中出现非特异扩增，那它就会影响到定量结果的可靠性与重复性。要避免这种不利因素，可以通过选择良好的引物并优化反应条件以消除非特异性影响。

TaqMan荧光探针法
　　PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5-3外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

项目	价格（元）	说明
引物设计合成	300元/对	客户提供基因名称（中英文全称）。
RT-PCR检测（普通电泳PCR）	100元/样本/指标	包括所有试剂，提供分析数据、步骤。
实时荧光定量（Taqman探针法）	200元/样本/指标	包括所有试剂，提供分析数据，图片、步骤(20例起)
SYBR Green 染料法	120元/样本/指标	包括所有试剂、提供数据、图片、实验步骤。

上海瓦兰代做实验项目：
一、分子生物学检测服务
1、 引物设计合成（人、大鼠、小鼠、兔等）
2、 基因表达水平检测、内参检测
3、 SNP检测服务
4、 甲基化检测服务
5、 测序技术服务
6、 芯片检测（全基因、MicroRNA）
7、 染色体分析

二、病理形态学检测
1、 HE、特殊染色（PAS、MASSON等）
2、 电镜（透射、扫描、免疫透射等）
3、 免疫组化（阳性表达部位、阳性面积、阳性细胞计数、微血管密度、
淋巴管密度、光密度等）
4、 TUNEL研究细胞凋亡，常规病理细胞形态分析
5、 组织芯片
6、 原位杂交（DNA、RNA、MicroRNA等）

三、蛋白质技术服务
1、 免疫印迹（Western-blotting）分析
2、 蛋白质组学
3、 凝胶迁滞实验（EMSA）分析DNA或RNA结合蛋白

四、免疫学检测服务
1、 酶联免疫（ELISA）技术
2、 放射免疫（RIA）
3、 化学发光
4、 常规生化检测

五、代谢组学
1、 GC-MS、LC-MS、NMR