环腺苷酸依赖性protein kinase A抑制剂

环腺苷酸依赖性protein kinase A抑制剂

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品牌:莼试

货号:CS-X13649

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库存 :24

英文名 :H89 dihydrochloride

CAS号 :130964-39-5

保质期 :有效期2年

供应商 :上海莼试

保存条件 :-20℃

规格 :1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 环腺苷酸依赖性protein kinase A抑制剂 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。


参数规格:
产品名称 环腺苷酸依赖性protein kinase A抑制剂
英文名称 H89 dihydrochloride
货号 CS-X13649
中文名称:环腺苷酸依赖性protein kinase A抑制剂
英文名称:H-89 dihydrochloride

产品规格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
H-89dihydrochloride是一种环腺苷酸依赖性protein kinase A抑制剂,IC50值为48nM;同时能够轻微抑制PKG,PKC,Casein Kinase等激酶活性。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:130964-39-5
别名:Protein kinase inhibitor H-89 dihydrochloride
纯度:98.94%
分子式:C₂₀H₂₂BrCl₂N₃O₂S
分子量:519.28
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方,将溶胶和结合两种功能统一,因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况,节省了需购买多种试剂盒的费用,
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。

四螨嗪标准溶(100μg/ml,u=4%)英文名(EN):Polystyrene, M.W. 2000特价促销  规格(SP):500MG
四螨嗪标准溶(10μg/ml,u=6%)英文名(EN):Poly(vinyl chloride), 特价促销  规格(SP):250G
四嘧羧(>98%,BR)英文名(EN):4Fluorostyrene,特价促销  规格(SP):1G
四姜黄素 英文名(EN):cisStilbene,96%特价促销  规格(SP):1ML
四生物蝶呤(THB)二盐英文名(EN):Vinyl chloride,≥99.5%特价促销  规格(SP):1ML
四生物蝶呤;沙蝶呤;(6R)BH4英文名(EN):Vinclozolin, 100 ng/μL特价促销  规格(SP):1ML
四生物蝶呤游离英文名(EN):2Acetylnorbornene, mixture of endo...特价促销  规格(SP):1G
四小檗(标准品)英文名(EN):1(Trimethylsiloxy)cyclohexene,特价促销  规格(SP):10G
四水合辅羧;四水合焦英文名(EN):2,4,4Trimethylpentene,特价促销  规格(SP):10G
四化铵(>98.0%(T))英文名(EN):Camphene,特价促销  规格(SP):25G
四雌,孕素英文名(EN):4(Trifluoromethyl)styrene,特价促销  规格(SP):1G
四雌,孕素(标准品)英文名(EN):1Tridecene,96%特价促销  规格(SP):5G
四溴蓝英文名(EN):4Acetoxystyrene,96%特价促销  规格(SP):5ML
四溴酞盐英文名(EN):Triphenylethylene,特价促销  规格(SP):5G
四溴双A(>98.0%(GC)(T))英文名(EN):2,4,6Trimethylstyrene,特价促销  规格(SP):1G
四溴双A双(2羟)(>93.0%(GC))英文名(EN):Triisobutylene特价促销  规格(SP):100ML
四溴荧光素盐(>85.0%(HPLC))英文名(EN):cis9Tricosene,特价促销  规格(SP):1G
四化三钴(>,BR)英文名(EN):TriOacetylDgalactal,特价促销  规格(SP):1G
环腺苷酸依赖性protein kinase A抑制剂 VimentinTGF Beta1 (Ttansforming Growth Factor – Beta1)抑制素α/Inhibin α抗体

VSIG4 (Vset and immunoglobulin domaincontaining protein 4)CaMK2b(calcium/calmodulindependent protein kinase II beita)白介素18抗体
WNK4(Ser/Thrprotein kinase WNK4; protein kinase with no lysine 4; protein kinase, lysine –dficient 4)CAP1/Park7/DJ1真核翻译起始子4E抗体
ZNF300 (zinc finger protein ZNF300) middleCAP2(Adenylyl cyclaseassociated protein 2)核蛋白4抗体(Ran结合蛋白4)
ZNF268 (zinc finger protein ZNF268) Nterminal (1a)TGF beta 2 Propeptide免疫球蛋白重链可变区抗体
ZNF268 (zinc finger protein ZNF268) middle (1b)TGF Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3)胰岛素样生长子结合蛋白7抗体
ZNF268 (zinc finger protein ZNF268) middle (1c)TGF Beta R2 peptide胰岛素样生长子结合蛋白6抗体
IFN Gamma(Interferon Gamma)Agmouse、ratThymosin Alpha1KB抑制蛋白激酶ε英文名称藤黄素小鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISAKit,/96T25mg
英文名称木犀草素-7-O-葡萄糖苷;青兰苷大鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISAKit,/96T200mg
英文名称3,4,5-三羟人细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISAKit,/96T200mg
英文名称小鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISAKit,/96T500mg
英文名称大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISAKit,/96T50mg
英文名称芹黄素;5,7,4'-
注意事项:
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。


 

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