Eco105I (SnaBI) (10 U/µL)

Eco105I (SnaBI) (10 U/µL)

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品牌:谷研

货号:GOY-C6843

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英文名 :详见说明书

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保质期 :详见说明书

供应商 :上海谷研

保存条件 :-20℃

规格 :详见说明书

作用及原理:
⒈溶液I—溶菌液:
溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA:(1)螯合Mg2+、Ca2+等金属离子,抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅基);(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II-NaOH-SDS液:
NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。
但当pH>12或pH<3时,就会引起双链之间氢键的解离而变性。
Eco105I (SnaBI) (10 U/µL)在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L,加抽提液时,该系统的pH就高达12.6,因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS:SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有:
1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
2)解聚细胞中的核蛋白。
3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R+-蛋白质的复合物,使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用,所以在以后的提取过程中,必须把它去除干净,防止在下一步操作中(用RNase去除RNA时)受到干扰。


根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理,可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一,盐析即在高浓度Nacl溶液中,蛋白质析出的现象。原理如下
1)Nacl溶液与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜;
2)Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷,从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出;
2.不同浓度下DNA分子构象(三维结构)不同,不同的构象溶解度也不同。
1)当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时,DNA溶解度最小,因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出;
2)DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高;


3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液,使得蛋白质析出,而DNA溶解度较大,通过高速离心,取上清并去除沉淀,进而去除蛋白质。
产品名称:Eco105I (SnaBI) (10 U/µL)
Enzyme:Eco105I(SnaBI)

保存温度:-20℃
货期:2-3天
CompatibleBuffer:10xBufferTango
OptimalReactionTemperature:37°C
SensitivetoHeatInactivation::Yes
MethylationSensitivity:CpGmethylation-sensitive, Notdammethylation-sensitive, Notdcmmethylation-sensitive
ThermoScientificEco105I(SnaBI)restrictionenzymerecognizesTAC^GTAsitesandcutsbestat37°CinTangobuffer(Isoschizomers:BstSNI,SnaBI).SeeReactionConditionsforRestrictionEnzymesforatableofenzymeactivity,conditionsfordoubledigestion,andheatinactivationforthisandotherrestrictionenzymes.Note:AlsoavailableasaFastDigestenzymeforrapidDNAdigestion.ThermoScientificconventionalrestrictionendonucleasesarealargecollectionofhighqualityrestrictionenzymes,optimizedtoworkinoneofthebuffersoftheFiveBufferSystem.Inaddition,theuniversalTangobufferisprovidedforconvenienceindoubledigestions.Alloftheenzymesexhibit100%activityintherecommendedbufferandreactionconditions.Toensureconsistentperformance,ThermoScientificrestrictionenzymereactionbufferscontainpremixedBSA,whichenhancesthestabilityofmanyenzymesandbindscontaminantsthatmaybepresentinDNApreparations.Features•Superiorquality—stringentqualitycontrolandindustryleadingmanufacturingprocess•Convenientcolor-codedFiveBufferSystem•IncludesuniversalTangobufferfordouble-digestions•BSApremixedinreactionbuffers•WideselectionofrestrictionendonucleasespecificitiesApplications•Molecularcloning•Restrictionsitemapping•Genotyping•Southernblotting•Restrictionfragmentlengthpolymorphism(RFLP)•SNPNote:Formethylationsensitivity,refertoproductspecifications.
DNA沉淀剂:
原则:不与DNA反应,对其无影响。
1.纯乙醇(二倍体积比);效率高,需要放置的时间短,在公司用Kit提取的时候,没有放置直接进行下一步;确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇,价格相对于纯乙醇便宜,但是会损失DNA;
3.异丙醇(0.6倍体积);
1)普通细胞上清液体,静止15-30min即可沉淀;
2)对于含量低,或者组织(比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA),则最好在-20℃放置2h或者以上,
本人提取肝脏组织DNA时候,最长时间放置了三天,对结果并无影响;上周提取细胞中cccDNA的时候,室温放置了15min,结果提出的DNA含量也挺高的,而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高,所以时间短点也可以,但是如果时间不是很着急,还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品:
改良察氏液体培养基说明书英文:Modified Czapek Dox Broth Medium  产品规格:250g  产品用途:用于霉菌的增菌培养  

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野生酵母培养基特价英文:产品规格:250g  产品用途:用于野生酵母计数培养  
土霉素麦芽提取物琼脂培养基供应英文:产品规格:250g  产品用途:
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马铃薯葡萄糖琼脂(USP)平板说明书英文:产品规格:9cm*10  产品用途:用于霉菌,酵母菌计数(GB/SN标准)  
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)说明书英文:Potato Dextrose Agar  产品规格:250g  产品用途:用于霉菌,酵母菌计数  
马铃薯琼脂培养基供应英文:Potato Agar Medium  产品规格:250g  产品用途:用于霉菌的鉴定培养  
Eco105I (SnaBI) (10 U/µL)人胰岛素样生长因子结合蛋白4elisa检测试剂盒

英文名称:Human IGFBP-4 ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:0.25 ng/ml
检测目标:IGFBP-4
应用:Sandwich ELISA

 

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