JM109感受态细胞

JM109感受态细胞

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品牌:谷研

货号:GOY-C6518

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库存 :53

英文名 :E.coliJM109CompetentCells

CAS号 :详见说明书

保质期 :保存至少6个月

供应商 :上海谷研

保存条件 :-70℃保存,液氮保存至少一年,-70℃

规格 :  袋

产品名称:JM109感受态细胞
英文名称:E.coliJM109CompetentCells

储存条件:-70℃保存,液氮保存至少一年,-70℃保存至少6个月
外观(性状):干冰运输,单加10kg干冰费
单位:袋
本公司生产的JM109感受态细胞是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达108,-70℃保存几个月转化效率不发生改变。 基因型:recAsupE44endA1hsdR17gyrA96relA1thiΔ(lac-proAB) F’[traD36proAB+lacIqlacZΔM15]  点:一种琥珀抑制型F’重组缺陷菌株。支持M13噬菌体载体的生长,对转染的DNA有修饰作用,但无限制作用。该菌株中的F’带有lacZΔM15,后者使得与在λZAP中编码的β-半乳糖苷酶氨基端进行α-互补,可用于蓝白斑筛选。 操作方法:(以下各步骤均为无菌操作) 1、将感受态细胞置于冰上融化,以下实验以100ul感受态细胞为例。 2、向感受态细胞悬液中加入需转化的目的DNA,注意目的DNA的体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一,轻轻旋转离心管以混匀内容物,冰浴放置30分钟。 3、将离心管置于42℃水浴中放置60-90秒,然后快速转移到冰浴中放置2-3分钟,注意不要摇动离心管。 4、向离心管中加入500ul无菌无抗的SOC或LB培养基,37℃180rpm振荡培养1小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。 5、取适量已转化的感受态细胞涂布含相应抗生素的SOC或LB平板,37℃倒置培养12-16小时。涂布用量可根据具体实验来调整,如转化的DNA总量较多,可取100ul左右转化产物涂板;反之,如果转化的DNA总量较少,可取200-300ul的转化产物涂板。过多菌液可以抑制细菌生长。如果预计的克隆较少,可通过离心后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。涂布剩余的菌液可4℃保存,如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的平板。 注意事项: 1、收到感受态细胞应保存在-70℃,不可反复冻融,否则其转化效率将会降低。 2、实验过程中应严格无菌操作,防止其它DNA的污染,避免为以后的筛选、鉴定带来影响。 3、转化时,转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA量过多或体积过大反而会降低转化效率。转化时DNA体积要小于感受态细胞体积的十分之一。 4、转化率的计算:转化率=产生菌落的总数/铺板DNA总量 5、为防止转化实验不成功,可以保留部分连接产物,以重新转化,将损失将到最低。
使用方法:
一:用新鲜组织样品
1. 估计完全浸没样品所需要本产品的体积(1g组织需10mL)。
2. 标记收集管并加入估计所需量的本产品。
3. 以zui快速度将样品剪切成厚度小于0.5cm的碎块。
: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存,有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
4. 将组织碎块完全浸没于收集管的本产品中。
5. 将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超过该温度下的zui长存放时间,如果要存放在-20℃或-80℃,需先将样品在 4℃放置过夜后再转移到zui后的温度。注:将样品转移到-20℃或-80℃前,需要倒弃保护液。常见存放温度与其zui长存放时间关系为如下: 
6. 从存放处取出样品 (-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化),用消过毒的镊子将组织碎块从保护液中取出。
7. 立即开始RNA 提取或进行其他处理 (如将样品分割成更小的碎块再重新保存等)。注:样品可以反复冻融二十次而其 RNA 质量不会受到影响。


操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。


以下是JM109感受态细胞的相关产品:
NFU1 Polyclonal Antibody资源名称:人角膜内皮细胞英文: NFU1 Polyclonal Antibody 种属 :HCEC-B4G12

RAB13 Polyclonal Antibody资源名称:小鼠心肌成纤维细胞英文: RAB13 Polyclonal Antibody 种属 :MCFs
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SCD Polyclonal Antibody资源名称:类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞英文: SCD Polyclonal Antibody 种属 :RA-FLSs
CD97 Polyclonal Antibody资源名称:牛子宫内膜上皮细胞英文: CD97 Polyclonal Antibody 种属 :BEND
GPR78 Polyclonal Antibody资源名称:人甲状腺癌细胞英文: GPR78 Polyclonal Antibody 种属 :TPC1
SERPING1  Polyclonal Antibody资源名称:人胃腺癌细胞(低分化)英文: SERPING1  Polyclonal Antibody 种属 :BGC-823
JM109感受态细胞小鼠白介素15elisa检测试剂盒

英文名称:Mouse IL-15 ELISA KIT
反应性:Mouse
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:12 pg/ml
检测目标:IL-15
应用:Sandwich ELISA
注意事项:
● 溶液PE 第一次使用前请按瓶上标签加入4 倍体积的无水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 无水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 无水乙醇,使用后立即盖紧盖子。
● 本产品对电泳使用的Agarose 种类没有严格限制,可以使用普通Agarose 。为了保证回收DNA 的质量和DNA 回收效率,希望使用高纯度的Agarose ,但没有必要一定要使用低熔点的Agarose 等。
● 电泳时请使用新鲜配制的TAE 电泳缓冲液,以免影响电泳及回收效果。
● 请适当延长电泳时间,在条带分离清晰后进行切胶回收,以免回收到多余杂带。
● 为提高DNA 回收收率,切胶时应尽量除去多余的胶块。
● 本试剂盒纯化柱的DNA 吸附能力强。但如果DNA 浓度小,或DNA 初始量少,回收率将会偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA 片段可直接用于各种酶促反应等,不会影响后续试验。
● 为了保证回收效率,请不要使用未调整pH 值的超纯水洗脱目的片段。
● 请严格按照操作步骤操作。


 

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