MBP与Strep (II)标签蛋白纯化层析组合精选

MBP与Strep (II)标签蛋白纯化层析组合精选

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货号:MBP与Strep (II)标签蛋白纯化层析组合精选

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重组蛋白在设计、构建时已融入纯化构想,可以通过亲和标签的作用进一步实现高纯度的纯化。
Cytiva针对MBP标签或Strep标签重组蛋白纯化应用提供了3步骤纯化平台方案:第1步骤使用标签亲和层析捕获蛋白,第2步骤根据表面不同的特性选用适当的离子交换剂分离蛋白质,第3步骤使用分子筛层析去除聚集体等杂质。
同时,Cytiva也提供了不同纯化方案的层析介质与相关耗材。
属性 类别 货号 名称
STEP 1 MBP标签蛋白纯化预装柱 28918778 MBPTrap 5 x 1mL
28918780 MBPTrap 5 x 5mL
Strep (II)标签蛋白纯化预装柱 28907546 StrepTrap HP 5 x 1mL
28907548 StrepTrap HP 5 x 5mL
29401320 StrepTrap 5 × 1 mL 
29401323 StrepTrap 5 × 5 mL
STEP 2 Capto离子交换系列 28934388 HiTrap Capto IEX Selection Kit
11001303 HITRAP CAPTO Q, 5X5ML
17544123 HITRAP CAPTO S, 5X5 ML
28916540 HiTrap Capto DEAE, 5X5ML
11003275 HITRAP CAPTO MMC, 5X5ML
17371755 HiTrap Capto S ImpAct 5x5mL
28405846 5x5 ml Hitrap Capto adhere
17531602 Capto Q 100 ml
17546802 Capto SP ImpRes, 100 mL
17531702 Capto MMC 100ml
17546855 HiTrap Capto SP ImpRes 5x5mL
17547055 HiTrap Capto Q ImpRes 5x5mL
STEP 3 凝胶过滤预装柱 29148721 Superdex 75 Increase 10/300 GL
28990944 Superdex 200 Increase 10/300 GL
29091596 Superose 6 Increase 10/300 GL
28989333 HiLoad 16/600 Superdex 75 pg
28989335 HiLoad 16/600 Superdex 200 pg
29323952 HiLoad 16/600 Superose 6 pg 
28989334 HiLoad 26/600 Superdex 75 pg
28989336 HiLoad 26/600 Superdex 200 pg

 

优惠信息

选择经典3步骤纯化方案中的产品组合,即可赢取最高3500元优惠,详情请咨询当地活动合作经销商或联系 Cytiva 销售专员。

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MBP标签蛋白纯化组合精选

Dextrin Sepharose High performance是用来纯化麦芽糖结合蛋白(MBP)标记的重组蛋白的色谱填料。
 

产品优点

1.     高结合载量≈10 mg/ml 填料, pH 稳定性> pH 7.0
2.     高纯度浓缩洗脱目标蛋白质
3.     用10 mM 麦芽糖温和洗脱,保护目标蛋白质的活性
4.     用0.5 M NaOH再生,快速方便
5.     容易放大

 
两步法或三步法纯化策略

 











 
 
第一步 亲和层析:
柱子: MBPTrap™ HP 1 ml
样品: 7 ml MBP2*-paramyosin-δ-Sal (Mr ~70 000) in E. coli lysate
结合液: 20 mM Tris-HCl, 200 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM DTT, pH 7.4
洗脱液: 10 mM maltose in binding buffer

第二步 凝胶过滤层析:
柱子: HiLoad™ 16/60 Superdex™ 200 pg
样品: Eluted pool from MBPTrap HP 1 ml
缓冲液: 10 mM sodium phosphate, 140 mM NaCl, pH 7.4



 
如图所示:在ÄKTA Xpress系统上,两步纯化MBP2*-paramyosin-δ-Sal标签蛋白

1、两步纯化制备2.2 mg 蛋白
2、
总的纯化时间3.4 h
3、洗脱得到的蛋白质具有高纯度
注:参见《层析介质应用手册》

Strep(II)标签蛋白纯化层析组合精选
新一代高产量重组蛋白纯化填料Strep-Tactin™ XT Sepharose™是一种亲和层析填料,用于纯化用Strep-tag II 和Twin-Strep-tag标记的重组蛋白。这些蛋白能够高特异性地与固定的Strep-Tactin XT配体结合,从而实现高纯度的目标蛋白纯化。

全新Strep-Tactin™ XT Sepharose具有以下优点:
1.更高载量,更高亲和力,更高回收率
沿用了Sepharose HP的基架保障了高分辨率,由于粒径只有34μm大小,结合的重组蛋白会以窄峰洗脱,从而程度地减少了进一步浓缩步骤的需要。相较于以前的StrepTactin HP载量提升到10 mg/mL,更高的亲和力,使得仅需一步纯化,即可获得纯度很高的目标蛋白
2.兼容多种化学添加剂,可在变性条件下纯化耐受6 M尿素,使得能够在变性条件下纯化蛋白,省去过往包涵体中需要换液透析的步骤,大大节省时间,提高纯化效率

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