去内毒素质粒小量提取试剂盒

库存 ：23

英文名 ：FreeEndotoxinPlasmidExtractionMiniKit

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：复检期1年

供应商 ：上海谷研

保存条件 ：酶附件-20℃，内毒素清除剂4℃，其它试剂RT

规格 ：  盒

DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
产品名称：去内毒素质粒小量提取试剂盒
英文名称:FreeEndotoxinPlasmidExtractionMiniKit
储存条件:酶附件-20℃，内毒素清除剂4℃，其它试剂RT，复检期1年
单位:盒
本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，根据离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA的原理特异性提取质粒DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。公司研制的内毒素清除剂，可最大限度地除去内毒素。从1-5ml大肠杆菌LB培养液中，可快速提取5-15μg高纯度质粒DNA，提取率达85-90%。使用本试剂盒提取的质粒DNA纯度高，可直接用于细胞转染等要求较高的实验，以及其他各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。
作用及原理：
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
去内毒素质粒小量提取试剂盒在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。

根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；

3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
以下是公司正在热销的产品：
CHRM4 Polyclonal Antibody 种属 :Mycena│rosea (Schumach.) Gramberg英文: CHRM4 Polyclonal Antibody培养方法
CEL Polyclonal Antibody 种属 :Omphalia│gracillima (Weinm.) Quél.英文: CEL Polyclonal Antibody 模式菌株:no
ALDH6A1 Polyclonal Antibody 种属 :Venturia│carpophila E.E. Fisher英文: ALDH6A1 Polyclonal Antibody 模式菌株:no
PFKP Polyclonal Antibody 种属 :Cryptosporiopsis│radicicola Kowalski & C. Bartnik英文: PFKP Polyclonal Antibody 模式菌株:no
AKR1B10 Polyclonal Antibody 种属 :Geomyces│pannorum (Link) Sigler & J.W. Carmich.英文: AKR1B10 Polyclonal Antibody 模式菌株:no
Symmetric DiMethyl-Histone H3-R17 Polyclonal Antibody 种属 :Drepanopeziza│populorum (Desm.) Höhn.英文: Symmetric DiMethyl-Histone H3-R17 Polyclonal Antibody 模式菌株:no
CAPZA1 Polyclonal Antibody 种属 :Tricholoma│matsutake (S. Ito & S. Imai) Singer英文: CAPZA1 Polyclonal Antibody 模式菌株:no
NR2C1 Polyclonal Antibody 种属 :Stropharia│ambigua (Peck) Zeller英文: NR2C1 Polyclonal Antibody 模式菌株:no
PKM Polyclonal Antibody 种属 :Suillus│flavidus (Fr.) J. Presl英文: PKM Polyclonal Antibody培养方法
ATF4 Polyclonal Antibody 种属 :Suillus│luteus (L.) Roussel英文: ATF4 Polyclonal Antibody培养基:14
CDKN1B Polyclonal Antibody 种属 :Trametes│orientalis (Yasuda) Imazeki英文: CDKN1B Polyclonal Antibody 模式菌株:no
GSK3A Polyclonal Antibody 种属 :Bionectria│ochroleuca (Schwein.) Schroers & Samuels英文: GSK3A Polyclonal Antibody 模式菌株:no
SIRT3 Polyclonal Antibody 种属 :Lyophyllum│shimeji (Kawam.) Hongo英文: SIRT3 Polyclonal Antibody 模式菌株:no
MLXIPL Polyclonal Antibody 种属 :Pholiota│nameko (T. Itô) S. Ito & S. Imai英文: MLXIPL Polyclonal Antibody培养方法
EIF4B Polyclonal Antibody 种属 :Pleurotus│sapidus (Schulzer) Sacc.英文: EIF4B Polyclonal Antibody 模式菌株:no
GSTK1 Polyclonal Antibody 种属 :Pycnoporus│sanguineus (L.) Murrill英文: GSTK1 Polyclonal Antibody 模式菌株:no
去内毒素质粒小量提取试剂盒小鼠白介素5elisa检测试剂盒
英文名称:Mouse IL-5 ELISA KIT
反应性:Mouse
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:7 pg/ml
检测目标:IL-5
应用:Sandwich ELISA