SABC(兔IgG)-AP kit

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英文名 ：SABC(Rabbit IgG)-AP Kit

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海博湖

保存条件 ：-20℃，避光，有效期1年

规格 ：瓶

产品名称：SABC(兔IgG)-AP kit
英文名称　SABC(Rabbit IgG)-AP Kit
储存条件　-20℃，避光，有效期1年
试剂盒组成：
 

产品名称	SABC(兔IgG)-AP kit
英文名称	SABC(Rabbit IgG)-AP Kit
货号	BH-DB6723

1， 封闭液（5%BSA）： 10ml。　
2， Bio-羊抗兔IgG浓缩液： 100ul。　
3， SABC-AP浓缩液： 100ul。　
4， 稀释液： 30ml。　
5， 1×AP反应缓冲液： 30ml　
6， 25×BCIP： 1ml 25×NBT： 1ml　
产品说明： 本试剂盒适合于一抗为兔IgG的免疫组化实验AP显色。 SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质（IP=10），经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。

操作步骤：
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
 1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
2．  每100mg固体组织置于培养皿中，手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；
3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；
4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；
2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
 

细胞数量	Lysis Buffer加入量
107个	0.5 mL～1 mL
5×106个	0.2 mL～0.5 mL

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；
6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
以下是SABC(兔IgG)-AP kit的相关产品：
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伪金丝桃素;Pseudohyperici 55954-61-5 10mg 订购|咨询
商陆皂苷甲 65497-07-6 检测用对照品 商陆皂苷A
升 Cimicifuga foetida L. 异阿魏酸 537-73-5 C10H10O4 ≥98% 4-己基间本二酚(H0420000
对照品美洛昔康100679-200401HPLC法含量测定
ichlorfon标准品 200mg标准品
胡椒Piper nigrum 4'-Demetxoxypiperlotine C none 807372-38-9 C15H19NO3 ≥95%
毛蕊花糖苷 61276-17-3 检测用对照品 类叶升麻苷
毛茛科植物粗果唐松草(ThalicumdasycarpumFisch.etHall.) Magnoflorine Iodide 典化木兰花减 4277-43-4 C20H24NO4.I PINENE OXIDE, alpha-(SG16838-100
对照品原儿茶醛110810-200205含量测定
本硫咪唑相关物质B标准品30mg本硫咪唑相关物质B标准品
刺桐Erythrina arborescens Erysoamidine (3beta)-1,2,6,7-四去氢-3,15,16-氧基刺桐烷-8-酮 52358-58-4 C19H21NO4 ≥95%
TyrobutyricumBrothBase
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气单胞菌鉴别琼脂 Aeromonas Differential Agar 250 用于分离培养和鉴别气单胞菌
桔汁琼脂(OSA)250g/瓶用于耐酸细菌的分离培养incubationmedia桔汁琼脂(OSA)250g/瓶用于耐酸细菌的分离培养
平板计数琼脂(含麦芽提取物) 250g 用于菌落总数测定。
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固定液的应用：
1．单纯固定液(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以pH7 2～7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1．单纯固定液
(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以 pH 7.2～7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液：使用时以80％～95％的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性甲醛，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用100%乙醇固定组织。
(3)4％的多：主要用于培养细胞的固定。
2．混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇－福尔马林，AF)固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95％乙醇脱水。
(3)Bouin固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适合于固定外膜致密的组织，亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清晰，但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效