Anti-ALCAM Polyclonal Antibody

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品牌:博湖

货号:BH-DB5478

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英文名 :Anti-ALCAM Polyclonal Antibody

CAS号 :详见说明书

保质期 :详见说明书

供应商 :上海博湖

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规格 :

Anti-ALCAM Polyclonal AntibodyVTI1A Others Human 人 VTI1A 人细胞裂解液 (阳性对照) 微量可调移液器P1000shēng huà shì jì容量:25克
人肾小球内皮细胞总RNAHRGEC NADL-异亮酸 DL-Isoleucine,99% 443-79-8 5G 通用试剂
绵羊皮肤细胞;OAR-S1 小鼠原成骨细胞,MC3T3-E1 Subclone 14细胞 TM3细胞,正常小鼠Leydig细胞硅藻土G;硅藻土,含流醋钙 Kiqsqlguhr G 61790-23-
人皮肤成纤维细胞;HSAS4硅烷偶
CAL-27(人舌鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2水杨酸甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC))质量规格:standard for GC,≥99.5%(GC)Methyl salicylate
HCM-c 人类心肌细胞 500,000cells 人肺动脉平滑肌细胞HPASMC油酸甲酯(Standard for GC,≥99%(GC))质量规格:Standard for GC,≥99%(GC)Methyl oleate
SGC-7901, 人胃腺癌细胞系氟芬那酸,氟灭酸质量规格:
产品名称:Anti-ALCAM Polyclonal Antibody
英文名称: Anti-ALCAM Polyclonal Antibody

宿主: Rabbit
别名: MEMD;CD166
应用: WB IHC
稀释比例: WB 1:200-1000. IHC 1:25-100.
交叉反应:  Human Mouse Rat
蛋白分子量: 65kDa
Gene ID: 214
保存: Store at -20°C. Avoid freeze / thaw cycles.
储存液: Buffer: PBS with 0.03% Proclin300, 50% glycerol, pH7.3.
纯化方法: Affinity purification
亚型: IgG
免疫原: A synthetic peptide of human ALCAM
性状: 液体
Public Immunogen Range: A synthetic peptide of human ALCAM
Subcellular Locations: Membrane Cytoplasm
Swiss Prot: Q13740
克隆类型:  Polyclonal Antibody
产品名称 Anti-ALCAM Polyclonal Antibody
英文名称 Anti-ALCAM Polyclonal Antibody
货号 BH-DB5478

操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
 1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2.  每100mg固体组织置于培养皿中,手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
        细胞数量         Lysis Buffer加入量
        107         0.5 mL~1 mL
        5×106         0.2 mL~0.5 mL
5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

固定液的应用:
1.单纯固定液(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以pH7 2~7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1.单纯固定液
(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以 pH 7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。
(3)4%的多:主要用于培养细胞的固定。
2.混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
(3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效

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