Sigma V900391-5G

保存条件 ：冷冻

保质期 ：5年

英文名 ：Sigma

库存 ：现货

供应商 ：上海文韧生物科技有限公司

CAS号 ：V900391-5G

规格 ：500ml

牛血清是牛血浆去除纤维蛋白后形成的 种复杂混合物，其中含有各种血浆蛋白、多肽、生长因子与激素等，在体外细胞培养过程中起到转脂/铁、解毒、生物起始信号、抑制蛋白酶消化和促进细胞贴壁的作用，是细胞培养基的重要成分”。随着现代生物制药技术的快速发展，细胞培养基作为细胞生长的物质基础，被广泛应用于细胞生物学和医学研究的各个领域，牛血清的需求量逐年递增。据统计 2004 年全球利用细胞培养技术生产的药物销售额 260.51 亿美元，占生物技术药物销售总额的 68.72%。高质量的牛血清产品有良好的市场前景。为排除牛血清原料中潜在的病源物威胁，我国在2010 年版《中华人民共和国药典》中要求采用牛肾原代细胞培养法判别牛腹泻病毒， 但是进一步的荧光抗体法检测病毒时，为试剂盒难以配备到相应病毒株巴美国联邦管理法规第 9号文件规定采用直接或间接免疫荧光染色法对胎牛血清外源病毒检测,包括20种病毒进行连传三代的中和抗体检测程序， 并最终以56 ℃C、30 min灭活或-40 ℃ y射线照射 25~35 kGy该项技术没有大规模商业化应用。 目前对辐照牛血清蛋白活性的破坏机制探索，以及病毒灭活的同时避免牛血清活性成分损伤的解决方法鲜见报道D。蛋白质处于不同的微环境下，其构象和活性发生相应的变化。目前国内外在牛血清蛋白与药物成分以及缓冲液离子间相互作用方面开展了大量的研究采用荧光光谱技术、圆二色谱、 紫外光谱、电子顺磁光谱、等温滴定微量热和排阻色谱技术研究 pH 值例、Cu(Ⅱ)、镍（Ⅱ）I%、 氧化锌量子点(1yansuanmahuang碱、盐酸伪ma黄碱12等物质与牛血清蛋白的相互作用过程中的蛋白内源荧光猝灭、紫外吸收、圆二色谱峰位及吸收强度与二级与三级结构变化的相关性。关于自蛋自与》球蛋白分子间的迁移和聚集性“也有部分研究。有报道采用 SDS-PAGE 法”1)和醋酸纤维膜电泳法1对血清中蛋白组分进行分析和鉴定， 关于辐照对牛血清特性和结构的影响报道鲜见。PTHDTRTRHTJHATJKASTAO不同剂量率辐照在晶体管材料1、吸水树脂[IS]牛肉蛋白组分1都有不同的损伤效应，本项目以液体牛血清为对象，对比经》射线和加速器两种不同射线分别辐照 0-50 kGy 后，蛋白的结构和特性变化，为抑制牛血清辐照灭菌时蛋白损伤提供技术参考。结果与讨论：y射线和电子束辐照对牛血清蛋白浓度浊度的影响辐照后牛血清的蛋白浓度和浊度测定结果见表1。与对照相比，经?射线或电子束辐照10 kGy剂量的牛血清蛋白浓度均有较大幅度下降，增大剂量后蛋白浓度的下降趋势变缓。两种辐照方式相比，剂量低于30 kGy时，电子束辐照的牛血清蛋白浓度高于>射线辐照的，剂量高于30 kGy时，》射线辐照的牛血清蛋白浓度高于电子束辐照。与对照相比，经，射线或电子束辐照后牛血清蛋白的浊度升高，并且随剂量的增加而增加；两种辐照方式相比，？射线辐照的牛血清蛋白浊度始终大于电子束的。牛血清辐照后浓度下降，浊度增加，推测与蛋白辐照交联，进而导致溶解度下降有关。由于外界因素，蛋白会发生聚集、浊度升高与沉淀的现象。徐幸莲等四研究免骨骼肌肌球蛋白时发现，增加蛋白浓度时肌球蛋白聚集，溶液浊度升高，此时蛋白质的浓度与浊度呈正相关变化，进一步增加浓度时，蛋白质浊度达到峰值，但蛋白的浓度下降。耿胜荣等，在研究中发现，固体明胶辐照后，剂量超过 17.2 kGy出现不溶物，溶液态明胶蛋白辐照后溶解度下降，不浴物较多，同时浓度下降。可以发现， 无论有无水分存在 蛋白球蛋白聚集，溶液浊度升高，此时蛋白质的浓度与独度呈正相关变化，进一步增加浓度时，蛋白质独度达到峰值，但蛋白的浓度下降。耿胜荣等12224)在研究中发现，固体明胶辐照后，剂量超过 17.2 kGy出现不溶物，溶液态明胶蛋白辐照后溶解度下降，不溶物较多，同时浓度下降。可以发现，无论有无水分存在，蛋白辐照后的分解和交联反应均会发生，导致浓度下降，浊度升高。由此可见，牛血清辐照后蛋白浓度下降，独度上升。电子束辐照的变化幅度低于，射线。 y 射线和电子束辐照对牛血清蛋白疏水性的影响牛血清辐照后蛋白的疏水性随剂量的增加逐渐上升，当剂量大于10 kGy时和剂量大于40kGy时，增加幅度更明显。两种辐照方式相比，电子束辐照牛血清的蛋白疏水性大于y射线的，尤其是当剂量大于10kGy后更明显。疏水基的相互作用是维持蛋白质三级结构的重要作用力，疏水键是疏水侧链为避开水相而群集在一起的一种相互作用力。牛血清辐照后疏水性提高，说明蛋白分子表面暴露大量的疏水基团，亲水基团在分子表面分布减少，蛋白的三级结构被破坏，这与蛋白浊度增加趋势一致。顾可飞和高美须25的研究表明，虾致敏蛋白的疏水性随剂量增加而增加，本研究与报道结果相似。蛋白辐照后，随着辐照剂量的增加，疏水性的增加会逐渐过渡至蛋白的溶解性下降，最终出现不溶于水的成分。综上可见，牛血清辐照后蛋白的疏水性随剂量的增加而升高，当剂量大于10kGy时，电子束辐照的牛血清其蛋白疏水性升高幅度大干，射线辐照的。牛血清经，射线和电子束辐照后白蛋白组分的热稳定性变化牛血清辐照后，经盐析、透析和冻干处理，获得白蛋baifen末。白蛋baifen末与水按1:2 混合、平衡后的差示扫描热流图射线福照，电子束福照），由于z射线照射的牛血清交联程度较高，提取到的白蛋白有限，30和138kGy的样品极少，故无数据，随着剂量的增加，降 下温凝胶峰变得尖锐，出现小杂峰。推测可能有不溶组分，凝胶温度不同造成的。辐照牛血清中各样品凝胶峰热流参数。随着辐照剂量的增加，白蛋白溶液降温凝胶的时间延长，凝胶温度下降，单位质量释放的热烙增加。两种辐照方式相比，电子束辐照的比z射线辐照的出峰时间短，峰温高，峰热恰高。在前期的明胶福照中发现，明胶凝胶温度下降，熔化温度升高，这与本研究部分相似。凝胶温度下降，主要由于可部分蛋白含量减少造成，这与本研究蛋白浓度下降、油度升高及疏水性升高的结果完全吻合。综上可见，牛血清辐照后白蛋白分子发生了交联，形成了凝胶杂峰，大分子导致在较高的温度下可以凝胶，但凝胶时间延长。