calcein-AM/PI活死细胞染色试剂

calcein-AM/PI活死细胞染色试剂

价格: ¥638.40

品牌:UBI

货号:U23-002A

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保存条件 :-20°C

保质期 :/

英文名 :/

库存 :500

供应商 :上海攸碧艾

CAS号 :/

规格 :500T

本产品含有Calcein-AM和PI两种组分。Calcein-AM是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,其荧光呈绿色(Ex=490nm, Em=515nm)。因其在传统的Calcein(钙黄绿素)基础上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基团,增加了疏水性,使其能够轻易穿透活细胞膜。一旦进入细胞后,Calcein-AM(本身不发荧光)被细胞内的酯酶剪切形成膜非渗透性的极性分子Calcein,从而被滞留在细胞内并发出强绿色荧光。由于死细胞缺乏酯酶,Calcein-AM仅用于对活细胞的细胞生存能力测试和短期标记。因此,Calcein-AM常常与死细胞荧光探针如碘化丙啶(PI)等联合使用,同时进行活细胞和死细胞的荧光双重染色。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)不能穿过活细胞的细胞膜,仅能穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光(Ex=535 nm, Em=615 nm),因此PI仅对死细胞染色。

本产品中Calcein-AM浓度为:1 mM,建议工作浓度1~10 μM;PI浓度为:1 mM,建议工作浓度1~10 μM;

使用方法(仅供参考):
1.Calcein-AM/PI工作液配制:(推荐Calcein-AM: 2 μM, PI: 4 μM) 分别取10 μl的Calcein-AM和20 μl的PI储存溶液,加入至5 ml的PBS中,充分混匀,备用; 【注意】:由于Calcein-AM的稳定性比较差,此染色工作液必须现配现用,并且在当天用完。 Calcein-AM和PI的最佳浓度是因不同的细胞种类而定,初次实验建议做梯度实验,以确定Calcein-AM和PI的最适浓度。
2.染色前先用PBS洗涤细胞两次;
3.加入适量的Calcein-AM/PI工作液(贴壁细胞覆盖即可),在培养箱中孵育15-30 min;
4.用PBS或适当的缓冲液洗涤细胞两次;
5.荧光显微镜下观察细胞染色结果, Calcein-AM检测波长:Ex=490nm(蓝光激发), Em=515nm;PI检测波长:Ex=535 nm(绿光激发), Em=615 nm; 储存条件 -20oC保存, 一年有效;
仅供科学研究使用 注意事项:
1.使用前先将低温保存的试剂在室温条件下放置20-30 min。
2.由于Calcein-AM对湿度非常敏感,工作液必须现配现用。
3.第一次使用可对储存液进行分装,以减少反复冻融次数。
4.血清的存在可能会干扰Calcein-AM染色,染色前请先用PBS洗涤细胞。
5.碘化丙啶(PI)有一定的致癌性,操作时一定要注意防护。若接触到皮肤,需要立即用自来水清洗。
6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

攸碧艾(上海)贸易有限公司

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