Anti-DAPK1 Polyclonal Antibody

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英文名 ：Anti-DAPK1 Polyclonal Antibody

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海博湖

保存条件 ：详见说明书

规格 ：瓶

Anti-DAPK1 Polyclonal Antibody人角质细胞HHFKAmberlite® IRC-748螯合型离子交换树脂质量规格：Amberlite® IRC-748
非洲绿猴肾细胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1 人肺腺癌细胞，A549细胞 QG-56(肺扁平上皮癌细胞)Amberlyst15离子交换树脂(湿)质量规格：湿Amberlyst 15 ion-exchange resin
人恶性多发性畸胎瘤细胞;ERA-2丁胺卡那霉素无水质量规格：效价：>900 u/mgAmikacin
GFRA1 Others Human 人 GFRA1 /
人导管癌细胞;HCC38腺苷 3'-1酸 5'-1酰硫酸锂盐水合物Adenosine 3'-phosphate 5'-phosphosulfate lithium salt hydrate质量规格：美国进口
XCL1 Others Human 人 XCL1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) rac (cis/trans)多奈哌齐N-氧化物rac (cis/trans) Donepezil N-Oxide质量规格：美国进口
CM-R054大鼠子宫成纤维细胞完全培养基100mL6-O-去甲多奈哌齐6-O
产品名称：Anti-DAPK1 Polyclonal Antibody
英文名称: Anti-DAPK1 Polyclonal Antibody
宿主: Rabbit
别名: DAPK
应用: WB IHC
稀释比例: WB 1:500-1:2000. IHC 1:50-1:100.
交叉反应:  Human Mouse
蛋白分子量: 160/152/36kDa
Gene ID: 1612
保存: Store at -20°C. Avoid freeze / thaw cycles.
储存液: Buffer: PBS with 0.03% Proclin300, 50% glycerol, pH7.3.
纯化方法: Affinity purification
亚型: IgG
免疫原: Recombinant protein of human DAPK1
Subcellular Locations: Cytoplasm Cytoskeleton Cytoskeleton
Swiss Prot: P53355
克隆类型:  Polyclonal Antibody

产品名称	Anti-DAPK1 Polyclonal Antibody
英文名称	Anti-DAPK1 Polyclonal Antibody
货号	BH-DB3333

操作步骤：
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
 1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
2．  每100mg固体组织置于培养皿中，手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；
3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；
4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；
2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

细胞数量	Lysis Buffer加入量
107个	0.5 mL～1 mL
5×106个	0.2 mL～0.5 mL

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；
6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
固定液的应用：
1．单纯固定液(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以pH7 2～7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1．单纯固定液
(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以 pH 7.2～7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液：使用时以80％～95％的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性甲醛，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用100%乙醇固定组织。
(3)4％的多：主要用于培养细胞的固定。
2．混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇－福尔马林，AF)固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95％乙醇脱水。
(3)Bouin固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适合于固定外膜致密的组织，亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清晰，但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效
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