Anti-SMAD4 Polyclonal Antibody

Anti-SMAD4 Polyclonal Antibody

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品牌:博湖

货号:BH-DB3056

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英文名 :Anti-SMAD4 Polyclonal Antibody

CAS号 :详见说明书

保质期 :详见说明书

供应商 :上海博湖

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规格 :

产品名称:Anti-SMAD4 Polyclonal Antibody
英文名称: Anti-SMAD4 Polyclonal Antibody

宿主: Rabbit
别名: DPC4;hSMAD4;JIP;MAD homolog 4;MADH4;Mothers against DPP homolog 4;SMAD 4;SMAD family member 4;SMAD4;MYHRS
应用: WB
稀释比例: WB 1:500-2000.
交叉反应:  Human
蛋白分子量: 60kDa
Gene ID: 4089
保存: Store at -20°C. Avoid freeze / thaw cycles.
储存液: Buffer: PBS with 0.03% Proclin300, 50% glycerol, pH7.3.
纯化方法: Affinity purification
亚型: IgG
免疫原: Recombinant protein of human SMAD4
性状: 液体
Public Immunogen Range: Recombinant protein of human SMAD4
Subcellular Locations: Cytoplasm Nucleus
Swiss Prot: Q13485
克隆类型:  Polyclonal Antibody
产品参数:
产品名称 Anti-SMAD4 Polyclonal Antibody
英文名称 Anti-SMAD4 Polyclonal Antibody
货号 BH-DB3056
免疫球蛋白:

注意事项: 
 1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
 2、虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
 3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
 4、本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
 5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作

操作步骤:
根据使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品: 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

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温馨提示:
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