酵母活性检测试剂盒AlamarBlue

库存 ：59

英文名 ：详见说明书

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：有效期一年

供应商 ：上海莼试

保存条件 ：-20℃避光保存

规格 ：详见说明书

操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 酵母活性检测试剂盒AlamarBlue对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。

参数规格:

产品名称	酵母活性检测试剂盒AlamarBlue
英文名称	详见说明书
货号	CSX9918

中文名称：酵母活性检测试剂盒AlamarBlue
英文名称：
产品规格：250T|500T|1000T
发货周期：1～3天
AlamarBlue 酵母活性检测试剂盒是应用新型的氧化还原指示剂阿尔玛蓝快速高灵敏度检测酵母活性的比色检测产品。
AlamarBlue 是一种氧化还原指示剂，能根据酵母的代谢活性产生吸光度变化和荧光信号。这种测定是基于具有代谢活性的细胞将试剂转换成荧光和比色指示剂的能力。受损和无活性细胞具有较低的天然代谢活性，因此对应的信号较低。
AlamarBlue 在氧化状态下呈现紫蓝色无荧光性，而在还原状态下，转变为呈粉红或红色荧光的还原产物，其吸收峰为530560nm，而散射峰为590nm。在酵母细胞增殖过程中，细胞内处于还原环境。进入酵母细胞内的活性检测染料被代谢中间体及细胞色素类还原后释放到酵母细胞外并溶于培养基中，使培养基从无荧光的靛青蓝变成有荧光的粉红色。最后用普通分光光度计或荧光光度计进行检测，吸光度和荧光强度与活性酵母细胞数成正比。染料经过验证安全无毒，可以用于酵母细胞活性和酵母细胞增殖的定量分析细胞毒性研究。
AlamarBlue 的无毒特性使酵母细胞可长期暴露于这种染料，因此可随时间进行测量或进行终点测量。
AlamarBlue 法采用单一试剂，可以连续、快速地检测酵母细胞的增生状态。由于AlamarBlue对酵母细胞无毒、无害，不影响细胞的蛋白质合成与分泌等活性，因此可以对同一批酵母细胞的增生状态进行连续观察和进一步的实验观察，因此有操作简便和几乎不干扰酵母细胞正常代谢的特点。
储存条件：检测液28℃避光保存；
有效期：一年。
产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方，将溶胶和结合两种功能统一，因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况，节省了需购买多种试剂盒的费用，
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
CDC20BANKRD40兔多肽YY(PYY)免疫试剂盒
Cell division control protein septin D1API5兔对酶1(PON1)免疫试剂盒
ccnb1ip1AQP3兔胆酰转移酶(CHAT)免疫试剂盒
Cdc14AAPOD兔超物歧化酶1,可溶(SOD1)免疫试剂盒
C7orf12ACSM3兔超物歧化酶[Mn],线粒体(SOD2)免疫试剂盒
CA XIARTS1兔超敏C反应蛋白(hsCRP)免疫试剂盒
Alpha caseinAIFM2兔叉头框蛋白P3(FOXP3)免疫试剂盒
CDCRELABL2兔补体片断5a(C5a)免疫试剂盒
酵母活性检测试剂盒AlamarBlue邻二基苄酯 Butyl Benzyl Phthalate856871ml，供HPLC法和GC法含量测定用
烈香杜鹃油Rhododendron约0.2 mL/支，供鉴别用
烈香杜鹃油Rhododendron约0.2 mL/支，供鉴别用
辽宁大米成分标准物质35g/瓶，有证书
亮蓝 Erioglaucine disodium salt384445920mg/支，检查
亮蓝 Erioglaucine disodium salt384445920mg/支，检查
亮氨 Leucine61905100mg，供鉴别和含量测定用
两性霉素B Amphotericin B139789350mg，供微生物效价测定用
两性霉素B Amphotericin B139789350mg，供HPLC含量测定用
两性霉素B Amphotericin B139789350mg，供微生物效价测定用
注意事项：
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。