人淋巴细胞分离液

库存 ：46

英文名 ：详见说明书

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：有效期一年

供应商 ：上海莼试

保存条件 ：-20℃避光保存

规格 ：详见说明书

注意事项：
1. 人淋巴细胞分离液微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
参数规格:

产品名称	人淋巴细胞分离液
英文名称	详见说明书
货号	CSX9944

中文名称：人淋巴细胞分离液
英文名称：
产品规格：200ml
发货周期：1～3天
人淋巴细胞分离液采用优质原料科学配方配制而成。适用于从血液及组织匀浆中分离所需细胞。本品为无菌溶液。
储存条件：室温(1825℃)避光保存。
开封后 28℃保存。
有效期：两年。
使用方法：
由于各离心机的性能差异以及实验室的温度不同，最佳分离条件(离心转速、离心时间等)请根据实际摸索。
1．取新鲜抗凝血 1ml，与1ml Hank’s液混匀。
2．将以上液体小心加于 1ml的细胞分离液的液面上。
3．以 1500RPM离心15分钟。
4．此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层：血浆或组织匀浆液层。第二层：环状乳白色淋巴细胞层。第三层：透明分离液层。第四层：红细胞层
● 此红细胞层，表面有悬起的部分白细胞层。收集界面上的细胞，放入含 45毫升Hank’s 液的试管中，充分混匀后，以15002000RPM离心10分钟。收集第二层细胞(淋巴细胞)沉淀经2次洗涤收集细胞。
产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方，将溶胶和结合两种功能统一，因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况，节省了需购买多种试剂盒的费用，
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。

CGR19Complement C3人粒细胞特异性抗核抗体(GSANA)免疫试剂盒
CCDC139CD66c人粒细胞趋化蛋白2(GCP2/CXCL6)免疫试剂盒
CHMP1ACPEB1人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体(GMCSF Ab)免疫试剂盒
CAPS1CST7人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)免疫试剂盒
CBLN1C22orf29人粒细胞集落刺激因子(GCSF)免疫试剂盒
CBLN2Contactin1人粒细胞集落刺激因子(CSF3)抗体免疫试剂盒
CBLN4Cathepsin C/DPP1人利什曼原虫(Leishmania)抗体(IgG)免疫试剂盒
CCM2Caspase 4人利钾尿肽(KP)免疫试剂盒
人淋巴细胞分离液己醇磺酯(C6:0)己醇磺酯(C6:0),标准品，有证书 ,100mg/500mg/1gm
蒺藜皂苷K Terrestrosin K19360507120mg/支，含量测定
蒺藜皂苷K Terrestrosin K19360507120mg/支，含量测定
蒺藜皂苷D Terrestrosin D17946423420mg/支，含量测定
蒺藜皂苷D Terrestrosin D17946423420mg/支，含量测定
急性子4g
吉它霉素 Kitasamycin1392218200mg，效价测定
吉米沙星磺盐Gemifloxacin Mesilate[210353530]10mg
吉米沙星13C,d2Gemifloxacin13C2,d21mg
吉非替尼杂质B Gefitinib Impurity B160381404520 mg/支，供HPLC法系统适用性试验用
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。