阿尔玛蓝

阿尔玛蓝

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品牌:莼试

货号:CSX9842

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库存 :24

英文名 :Alamar Blue

CAS号 :详见说明书

保质期 :有效期一年

供应商 :上海莼试

保存条件 :-20℃避光保存

规格 :详见说明书

注意事项:
1. 阿尔玛蓝微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
参数规格:
产品名称 阿尔玛蓝
英文名称 Alamar Blue
货号 CSX9842
中文名称:阿尔玛蓝
英文名称:Alamar Blue

产品规格:100T
发货周期:1~3天
阿尔玛蓝(Alamar Blue)是一种氧化还原指示剂,能根据代谢活性产生吸亮度变化和荧光信号。这是一种安全无毒的染料,可用于细胞活性和细胞增殖的定量分析以及细胞因子生物测定和体外细胞毒性研究,能有效测定动物、真菌和细菌细胞的天然代谢活性。Alamar Blue在氧化状态下呈现紫蓝色无荧光性,而在还原状态下,转变为呈粉红或红色荧光的还原产物,反映所研究的细胞或微生物对氧分子的消耗,因而常被用作氧化还原指示剂,以显示被观察细胞和细菌的代谢活动。这种测定是基于具有代谢活性的细胞将试剂转换成荧光和比色指示剂的能力。在细胞增殖过程中,细胞内NADPH/NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高,处于还原环境。摄入细胞内的染料被这些代谢中间体及细胞色素类还原后释放到细胞外并溶于培养基中,使培养基从无荧光的靛青蓝变成有荧光的粉红色。受损和无活性细胞具有较低的天然代谢活性,因此对应的信号较低。可以用普通分光光度计或荧光光度计检测,其激发光波长在530560 nm之间,发射光波长为590 nm。吸光度和荧光强度与活性细胞数成正比。
本品可广泛地用于细胞增殖代谢,药物的细胞毒作用的体外测定以及病原微生物的的快速检测与鉴定。 与台盼兰、TTC、MTT、MTS等分析法相比,Alamar Blue具有更多的优势。Alamar Blue采用单一试剂,可以连续、快速地检测细胞的增生状态。由于Alamar Blue对细胞无毒、无害,不影响细胞的抗体合成与分泌等活性,因此可以对同一批细胞的增生状态进行连续观察和进一步的实验观察,因此有操作简便和几乎不干扰细胞正常代谢的特点。
注意事项
1)需客户自行准备100%还原型Alamar Blue试剂。为得到还原型Alamar Blue,需配制Alamar Blue与细胞培养基的混合溶液,Alamar Blue与细胞培养基的比值为1:10,高压灭菌15min。(不能对浓缩的Alamar Blue高压灭菌,也不能用PBS配制溶液,因为100%还原型Alamar Blue在PBS中不稳定。)
2)为得到好的结果,建议实验前先摸索孵育时间和接种细胞数量。
3)合适密度的细胞可以增加检测灵敏度。对于96 孔板,我们建议每孔接种100 微升细胞,细胞浓度范围为:贴壁细胞在10010,000/孔,悬浮细胞在2,00050,000/孔,并以培养基为空白对照。对于384 孔板,细胞浓度和接种量均减半。
4)整个过程均应为无菌操作,因为微生物污染物同样可以还原检测试剂而影响实验结果。
5)注意接种细胞浓度和加入检测试剂后孵育时间。细胞浓度过高或孵育时间过长,会导致继发性还原反应,产生无色和荧光消失。
6)孵育时,须避光。
7)本产品可以使用荧光或分光光度计检测,但荧光的灵敏度高,实验误差小,推荐使用荧光检测。
储存条件:4℃,有效期一年
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方,将溶胶和结合两种功能统一,因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况,节省了需购买多种试剂盒的费用,
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。


SERPINB4TRF1谷氨受体红藻氨离子1抗体
Sphingomyelin Synthase 2TrkA一般受体磷肌醇相关支架蛋白1抗体
Squalene EpoxidaseTRAF1谷氨受体红藻氨离子5抗体
SULT1A1TRAF2 棕榈酰转移酶GODZ抗体
SPINK1/SPINK3Tau proteinG蛋白信号调节蛋白1抗体
Sulfatase 1TARDBPG受体β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2抗体
SERPINA12Tenascin CG蛋白α抗体
SIRT4TFF3G蛋白β样蛋白抗体
阿尔玛蓝十二酯/月桂酯十二酯/月桂酯,标准品,有证书 ,100mg/500mg/1gm/5gm/10gm

十二甘油三酯(C12:0)538249十二甘油三酯(C12:0),标准品,有证书 ,100mg/500mg/1gm
十二甘油二酯/月桂甘油二酯(C12:0)27638002十二甘油二酯/月桂甘油二酯(C12:0),标准品,有证书 ,100mg/500mg/1gm
十二/月桂(C12:0)143077十二/月桂(C12:0),标准品,有证书 ,100mg/500mg
十二碳烯酰(顺11)(C12:1)十二碳烯酰(顺11)(C12:1),标准品,有证书 ,100mg/500mg/1gm
十二碳烯酯(顺11)(C12:1)十二碳烯酯(顺11)(C12:1),标准品,有证书 ,100mg/500mg/1gm/5gm/10gm
十二碳烯酯(顺11)(C12:1)十二碳烯酯(顺11)(C12:1),标准品,有证书 ,100mg/500mg/1gm/5gm/10gm
十二碳烯甘油三酯(cis11)(C12:1)十二碳烯甘油三酯(cis11)(C12:1),标准品,有证书 ,100mg/500mg/1gm
十二碳烯甘油二酯(顺11)(C12:1)十二碳烯甘油二酯(顺11)(C12:1),标准品,有证书 ,100mg/500mg/1gm
十二碳烯甘油单酯(顺11)(C12:1)十二碳烯甘油单酯(顺11)(C12:1),标准品,有证书 ,100mg/500mg/1gm
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。


 

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