TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Alexa Fluor 488)

库存 ：31

英文名 ：TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 488)

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：有效期一年

供应商 ：上海莼试

保存条件 ：-20℃避光保存

规格 ：详见说明书

注意事项：
1. TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Alexa Fluor 488)微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
参数规格:

产品名称	TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Alexa Fluor 488)
英文名称	TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 488)
货号	CSX9808

中文名称：TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Alexa Fluor 488)
英文名称：TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 488)
产品规格：20T
发货周期：1～3天
本试剂盒应用范围广，可用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180200bp的DNA ladder。
TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling) 细胞凋亡检测试剂盒（Alexa Fluor 488）可以用来检测组织细胞在凋亡晚期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是在末端脱氧核糖核苷酸转移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT）的作用下，在基因组DNA断裂时暴露出的3′羟基（3′OH）末端掺入Alexa Fluor 48812dUTP，从而可以用荧光显微镜或流式细胞仪检测。
Alexa Fluor 488染料稳定性更高，信号更强，从而使标记物更亮，抗淬灭能力更强。
试剂盒组份：
5×Equilibration Buffer ——————————750μl
Alexa Fluor 48812dUTP Labeling Mix————100 μl
Recombinant TdT Enzyme ——————————20 μl
Proteinase K(2 mg/ml)——————————— 40 μl
DNase I (1 U/μl)————————————— 5μl
10×DNase I Buffer with MgCl2—————— 100 μl
储存条件：20℃，有效期一年。
产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方，将溶胶和结合两种功能统一，因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况，节省了需购买多种试剂盒的费用，
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。

PhosphoVASP(Ser239)PhosphoSHP2 (Tyr477)FAM160B1蛋白抗体
phosphoVEGF receptor 2 (Tyr1059)SYF2FAM161B蛋白抗体
V.cholera OgawaSOAT2FAM151A蛋白抗体
VAMP1+2+3Saitohin跨膜蛋白29抗体
VGF/NERP2Synaptotagmin 1FAM154A蛋白抗体
VP2phosphoSYT1(Ser309)FAM155A蛋白抗体
VEGFDSynaptotagmin 5FAM164B蛋白抗体
VDCCL alphaphosphoDOK1 (Ser450)FRMD3蛋白抗体
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Alexa Fluor 488)铁矿石成分分析标准物质（磁铁矿）50g/瓶
铁矿石成分分析标准物质Iron ore100g/瓶
铁矿石成分分析标准物质Iron ore100g/瓶
铁黄铜成分分析标准物质Iron brass brass50g/瓶
铁蛋白(Fer)3支/套，0.5ml/支，供免疫测定用
铁蛋白(Fer)3支/套，0.5ml/支，供免疫测定用
铁棒锤 ACONITI PENDULI ET ACONITI FLAVI RADIX2g/支，鉴别/检查用
铁棒锤 ACONITI PENDULI ET ACONITI FLAVI RADIX2g/支，鉴别/检查用
甜蜜素，纯品型，标准品,有证书139059甜蜜素，纯品型，标准品,有证书 99.80%,0.25g
天仙藤3g
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。